源于人軀干皮膚真皮的成纖維樣細(xì)胞的間充質(zhì)干細(xì)胞分化潛能
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【摘要】:目的:研究從人皮膚真皮組織中分離培養(yǎng)的成纖維樣細(xì)胞向中胚層細(xì)胞分化的潛能,初步探討其替代自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)用于組織損傷和缺損修復(fù)的可行性。方法:將一定大小的成人腹部全層皮膚組織分別用分散酶和Ⅰ型膠原酶消化,分離獲得真皮來源總細(xì)胞。單層培養(yǎng)擴(kuò)增的細(xì)胞在含有一定濃度N2、B27、堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)和表皮細(xì)胞生長因子(EGF)的無血清培養(yǎng)液中進(jìn)行懸浮培養(yǎng),并收集培養(yǎng)液中懸浮存在的球狀細(xì)胞聚集體(SDDSs),用含胎牛血清的培養(yǎng)液進(jìn)一步單層擴(kuò)增細(xì)胞。以免疫細(xì)胞熒光法分析細(xì)胞和鑒定細(xì)胞的分化特性。結(jié)果:真皮中分離的一些單個(gè)細(xì)胞在無血清培養(yǎng)液中分裂增殖形成SDDSs;在含血清的單層培養(yǎng)條件下,從SDDSs分離培養(yǎng)的細(xì)胞增殖活躍,細(xì)胞表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)志物CD90、CD105和波形蛋白;分別向骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞以及脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化后,呈現(xiàn)類似于BMSCs分化特點(diǎn),分化的細(xì)胞呈茜素紅、番紅O和油紅O特殊染色陽性反應(yīng),但真皮細(xì)胞分化形成的軟骨細(xì)胞番紅O染色弱于骨髓干細(xì)胞來源的軟骨細(xì)胞。結(jié)論:結(jié)合無血清培養(yǎng)和有血清培養(yǎng)法,可從人真皮組織中分離培養(yǎng)具有向軟骨細(xì)胞、骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞分化潛能的細(xì)胞,此細(xì)胞將有望替代BMSCs用于臨床組織損傷修復(fù)的再生治療。
【作者單位】: 吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)系病理生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;吉林大學(xué)第一醫(yī)院骨科;吉林大學(xué)藥學(xué)院生物組織工程系;
【關(guān)鍵詞】: 皮膚 真皮 間充質(zhì)細(xì)胞 軟骨細(xì)胞 骨細(xì)胞
【基金】:教育部回國留學(xué)生基金資助課題(3C113H063426) 吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)科研支持計(jì)劃—前沿交叉學(xué)科新項(xiàng)目資助課題(2013101002)
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 真皮成纖維細(xì)胞來源于胚胎中胚層間質(zhì)細(xì)胞,是人體內(nèi)分布范圍最廣、參與組織修復(fù)最重要的一類細(xì)胞[1]。與其他中胚層來源的細(xì)胞不同,真皮成纖維細(xì)胞保留了中胚層細(xì)胞增殖能力強(qiáng)、體外培養(yǎng)不易老化及多次傳代仍能保持強(qiáng)大增殖力的特性;同時(shí),真皮成纖維細(xì)胞取材與培養(yǎng)十分簡單,被
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6 張e
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