LIF和bFGF對臍帶間充質(zhì)干細胞體外自我維持和更新的影響
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【摘要】:目的:研究LIF聯(lián)合bFGF對人臍帶間充質(zhì)干細胞hUC-MSC增殖、干性維持及衰老的影響。方法:實驗分為4組:對照組加入完全培養(yǎng)基(含10%FBS的α-MEM)常規(guī)培養(yǎng);LIF組,加入含10 ng/ml LIF的完全培養(yǎng)液;bFGF組,加入含10 ng/ml bFGF的完全培養(yǎng)液;聯(lián)合組,加入含10 ng/ml LIF和10 ng/ml bFGF的完全培養(yǎng)液。采用細胞計數(shù)試劑盒8(cell counting kit 8,CCK-8)測定各組第4代hUC-MSC生長曲線;在倒置相差顯微鏡下觀察各組hUC-MSC形態(tài)變化;β-半乳糖苷酶染色檢測各組細胞衰老情況;RT-PCR檢測表達情況。結(jié)果:4組細胞生長曲線均近似S形,細胞增殖速率表現(xiàn)為聯(lián)合組bFGF組LIF組對照組。對照組細胞較早出現(xiàn)衰老,增殖減慢;LIF組細胞早期形態(tài)維持較好,但增殖相對緩慢,后期大部分細胞衰老;bFGF組部分細胞呈衰老改變,但增殖較快;聯(lián)合組細胞增殖迅速,能長期維持hUC-MSC形態(tài)特征,僅有少量衰老細胞。RT-PC R顯示,LIF和bFGF均能上調(diào)PCNA、OCT4、NANOG,下調(diào)P16、P21、P53的表達,其聯(lián)合作用效果更明顯。結(jié)論LIF聯(lián)合bFGF不僅可以促進hUC-MSC增殖,維持其干性而且能夠延緩hUC-MSC的衰老。
【作者單位】: 南昌大學研究生院醫(yī)學部;南昌大學第二附屬醫(yī)院骨科;九江學院基礎(chǔ)醫(yī)學院;
【關(guān)鍵詞】: h UC-MSC LIF b FGF 自我更新 自我維持
【基金】:國家自然科學基金資助項目(81160226)
【分類號】:R329.28
【正文快照】: 人臍帶間充質(zhì)干細胞(human umbilical cordmesenchymal stem cells,h UC-MSC)是一類來源于臍帶組織,具有自我更新和多向分化潛能的干細胞。h UC-MSC與其他來源的間充質(zhì)干細胞具有相似的分化潛能、免疫表型與塑料貼壁性,比骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow derived mesenchymal st
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本文編號:410828
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