本文關(guān)鍵詞：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體的生物學(xué)特性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探討正常人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cord mesenchymal stromal cells,hUC-MSCs)分泌的外泌體(exosomes)的免疫調(diào)節(jié)功能及對(duì)惡性腫瘤細(xì)胞體外增殖的影響。方法采用組織貼壁法分離培養(yǎng)hUC-MSCs,收集第3~6代hUC-MSCs上清液,使用超速離心法分離純化exosomes;通過(guò)電子顯微鏡觀察exosomes形態(tài)并分析其直徑和直徑分布范圍等特征;采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)其表面hUC-MSCs來(lái)源的CD44、CD73標(biāo)志物。將exosomes與正常人外周血單個(gè)核細(xì)胞共培養(yǎng),采用MTT檢測(cè)exosomes對(duì)淋巴細(xì)胞增殖的影響,ELISA法檢測(cè)上清液中IL-4和INF-γ的分泌量。選擇慢性粒細(xì)胞白血病(CML)K562細(xì)胞株,加入exosomes共培養(yǎng),應(yīng)用MTT法、PI/AnnexinⅤ雙染流式法檢測(cè)exosomes對(duì)癌細(xì)胞體外生長(zhǎng)增殖、凋亡的影響。結(jié)果組織貼壁法成功分離hUC-MSCs,傳代后呈長(zhǎng)梭狀生長(zhǎng)。電鏡觀察分離得到的exosomes為橢圓形膜性小囊泡,經(jīng)統(tǒng)計(jì)得出其直徑在6.8~78.1nm之間,且分布比較集中。流式細(xì)胞術(shù)測(cè)得exosomes高表達(dá)黏附分子CD44(54.1%)與干細(xì)胞標(biāo)志物CD73(31.5%),MTT和ELISA檢測(cè)結(jié)果表明,不同濃度的exosomes均抑制外周血單個(gè)核細(xì)胞增殖且抑制細(xì)胞因子IL-4和INF-γ的分泌,呈現(xiàn)劑量依賴性。體外實(shí)驗(yàn)表明exosomes對(duì)K562細(xì)胞株具有抑制增殖、促進(jìn)凋亡的作用。結(jié)論 hUC-MSCs來(lái)源的exosomes具有免疫調(diào)節(jié)作用及抑制K562細(xì)胞增殖的作用。
【作者單位】： 蚌埠醫(yī)學(xué)院臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)中心;蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院;蚌埠醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 間充質(zhì)干細(xì)胞 外泌體 免疫調(diào)節(jié) 增殖 凋亡
【基金】：蚌埠醫(yī)學(xué)院研究生科研創(chuàng)新計(jì)劃(No.Byycx1409) 安徽省大學(xué)生創(chuàng)業(yè)創(chuàng)新項(xiàng)目(No.AH201410367024)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cordmesenchymal stromal cells,hUC-MSCs)是一類具有多向分化能力和自我更新能力的干細(xì)胞[1-2]。它在胚胎時(shí)期的第4~12天進(jìn)入Wharton’s jelly并且活躍至胎兒娩出。因臍帶具有取材容易,不容易被污染,不涉及道德、倫理和法律方面的問(wèn)題等

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  本文關(guān)鍵詞：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體的生物學(xué)特性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：409842