目的探討高糖誘導(dǎo)氧化應(yīng)激后,Bmal1調(diào)控的自噬在細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷中的作用。方法采用隨機(jī)數(shù)字表法將PC-12細(xì)胞分為4組(n=6):低糖組(NG組)、低糖缺氧復(fù)氧組(NH/R組)、高糖組(HG組)和高糖缺氧復(fù)氧組(HH/R組)。采用高糖刺激24 h建立高糖模型,缺氧3 h復(fù)氧6 h建立缺氧復(fù)氧損傷模型。LDH檢測(cè)細(xì)胞活性; ROS,SOD和MDA檢測(cè)氧化應(yīng)激水平; AnnexinⅤ-FITC/PI流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率; Western blot檢測(cè)Bmal1,Beclin-1的表達(dá);電鏡觀察自噬小體數(shù)量。結(jié)果與NG組相比,NH/R組SOD、Bmal1降低,LDH、ROS、MDA、凋亡率、Beclin-1升高,自噬小體增多(P <0. 05);與NG組相比,HG組SOD、Bmal1、Beclin-1降低,自噬小體減少,LDH、ROS、MDA、凋亡率升高(P <0. 05);與NH/R組相比,HH/R組SOD、Bmal1、Beclin-1降低,自噬小體減少,LDH、ROS、MDA、凋亡率升高(P <0. 05);與HG組相比,HH/R組SOD、Bmal1降低,LDH、...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)及分組
    1.3 指標(biāo)檢測(cè)
        1.3.1 檢測(cè)細(xì)胞活性與氧化應(yīng)激水平
        1.3.2 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        1.3.3 免疫蛋白印跡法檢測(cè)Bmal1、Beclin-1
        1.3.4透射電鏡檢測(cè)自噬小體
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)結(jié)果
    2.2 細(xì)胞凋亡指標(biāo)檢測(cè)
    2.3 Bmal1及自噬指標(biāo)檢測(cè)
3 討論



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