腸道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)是小RNA病毒科腸道病毒屬的成員,基因組為單股正鏈RNA,主要感染5歲以內(nèi)的嬰幼兒。多數(shù)EV71感染表現(xiàn)為手足口部的皰疹、皮疹和發(fā)熱等癥狀,部分患兒會出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥,甚至會導致死亡。目前對于EV71的致病機制尚不明確,但以往研究表明病毒基因組的多個區(qū)域均與病毒復制能力和毒力相關,本課題組之前研究表明EV71的非結構蛋白2A能夠影響病毒的復制能力和毒力,但其關鍵氨基酸位點的精確定位還需進一步研究。本研究通過比較不同毒力表型的EV71毒株中非結構蛋白2A的差異,利用反向遺傳學技術構建并拯救突變型毒株,研究2A蛋白的關鍵氨基酸在EV71致病機制中的作用,為疫苗和藥物的研發(fā)提供理論基礎。目的1.比較兩株EV71不同毒力表型株2A片段的氨基酸序列差異,將強毒株2A蛋白的關鍵氨基酸突變成弱毒株相應位置的氨基酸,構建并拯救突變型毒株。2.比較突變后的病毒與親本毒株在復制能力、致細胞損傷能力和自噬等方面的差異,探究2A蛋白上的毒力候選位點在EV71致病機制中的作用。方法1.利用重疊融合PCR技術得到突變后的目的片段,將目的片段酶切置換到含有EV...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要 ABSTRACT 符號說明 前言 一、手足口病的流行病學特征 二、EV71的基因組結構 三、腸道病毒71型的致病機制 實驗材料與方法 一、實驗材料 二、實驗儀器 三、實驗方法 實驗結果 一、突變型毒株全長cDNA的構建 二、突變型毒株的拯救 三、突變型毒株的鑒定 四、突變型毒株的毒力檢測 討論 結論 創(chuàng)新與不足之處 附錄、附圖 參考文獻 致謝 攻讀學位期間發(fā)表的學術論文 學位論文評閱及答辯情況表



本文編號：4035215