本文關(guān)鍵詞：LV-calb2和LV-siRNA-calb2慢病毒載體的構(gòu)建及其在睪丸間質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:構(gòu)建鈣視網(wǎng)膜蛋白(CALB2)基因超表達(dá)及小干擾RNA(siRNA)慢病毒載體,觀察CALB2對睪丸間質(zhì)細(xì)胞雄激素合成的調(diào)節(jié)作用。方法:合成超表達(dá)及干涉的質(zhì)粒,轉(zhuǎn)入制備好的細(xì)菌感受態(tài)細(xì)胞,聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)鑒定陽性重組子后測序驗證,確認(rèn)構(gòu)建成功的超表達(dá)及干涉慢病毒載體。用上述慢病毒載體分別感染MLTC-1及R2C間質(zhì)細(xì)胞,觀察感染效率,而后用放射免疫法檢測睪酮和孕酮的合成。結(jié)果:PCR和基因測序證實LV-calb2和LV-si RNA-calb2慢病毒載體構(gòu)建成功,并可高效感染MLTC-1及R2C細(xì)胞。超表達(dá)CALB2后,MLTC-1細(xì)胞睪酮生成顯著增加(P0.001);干涉CALB2表達(dá)后,R2C間質(zhì)細(xì)胞孕酮生成顯著減少(P0.05)。結(jié)論:成功構(gòu)建了calb2基因超表達(dá)及干涉慢病毒載體,并可體外轉(zhuǎn)染睪丸間質(zhì)細(xì)胞系。初步結(jié)果表明,CALB2可促進(jìn)間質(zhì)細(xì)胞類固醇激素生成。
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科;
【關(guān)鍵詞】： 鈣結(jié)合蛋白 維生素D依賴性 慢病毒屬 睪丸 萊迪希細(xì)胞 雄激素類
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81170559,81370754,31301182) 江蘇省衛(wèi)生廳項目(ZX201110) 江蘇省婦幼保健重點(diǎn)學(xué)科(FXK201221)
【分類號】：R339.2
【正文快照】： 睪丸間質(zhì)細(xì)胞合成和分泌雄激素主要受下丘腦-垂體-性腺軸(hypothalamus-pituitary-gonadaxis,HPG軸)調(diào)控,間質(zhì)細(xì)胞膜上的黃體生成激素(LH)受體(LHR)介導(dǎo)垂體分泌的LH作用。越來越多的證據(jù)表明,雄激素合成還受到睪丸內(nèi)的局部調(diào)節(jié)——即通過睪丸內(nèi)的旁分泌及自分泌途徑調(diào)節(jié)雄激

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本文編號：403451