本文關鍵詞：LV-calb2和LV-siRNA-calb2慢病毒載體的構建及其在睪丸間質細胞的表達，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:構建鈣視網膜蛋白(CALB2)基因超表達及小干擾RNA(siRNA)慢病毒載體,觀察CALB2對睪丸間質細胞雄激素合成的調節(jié)作用。方法:合成超表達及干涉的質粒,轉入制備好的細菌感受態(tài)細胞,聚合酶鏈反應(PCR)鑒定陽性重組子后測序驗證,確認構建成功的超表達及干涉慢病毒載體。用上述慢病毒載體分別感染MLTC-1及R2C間質細胞,觀察感染效率,而后用放射免疫法檢測睪酮和孕酮的合成。結果:PCR和基因測序證實LV-calb2和LV-si RNA-calb2慢病毒載體構建成功,并可高效感染MLTC-1及R2C細胞。超表達CALB2后,MLTC-1細胞睪酮生成顯著增加(P0.001);干涉CALB2表達后,R2C間質細胞孕酮生成顯著減少(P0.05)。結論:成功構建了calb2基因超表達及干涉慢病毒載體,并可體外轉染睪丸間質細胞系。初步結果表明,CALB2可促進間質細胞類固醇激素生成。
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學科;
【關鍵詞】： 鈣結合蛋白 維生素D依賴性 慢病毒屬 睪丸 萊迪希細胞 雄激素類
【基金】：國家自然科學基金(81170559,81370754,31301182) 江蘇省衛(wèi)生廳項目(ZX201110) 江蘇省婦幼保健重點學科(FXK201221)
【分類號】：R339.2
【正文快照】： 睪丸間質細胞合成和分泌雄激素主要受下丘腦-垂體-性腺軸(hypothalamus-pituitary-gonadaxis,HPG軸)調控,間質細胞膜上的黃體生成激素(LH)受體(LHR)介導垂體分泌的LH作用。越來越多的證據表明,雄激素合成還受到睪丸內的局部調節(jié)——即通過睪丸內的旁分泌及自分泌途徑調節(jié)雄激

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 傅鵬;原理;李金花;王春花;李林;原愛紅;馬駿;;小鼠動力蛋白激活蛋白1-shRNA慢病毒載體的構建及在足細胞中的敲低效應[J];第二軍醫(yī)大學學報;2012年10期

2 劉欣春;朱悅;;靶向大鼠Nogo受體基因的小發(fā)夾RNA慢病毒載體的構建及病毒包裝[J];山西醫(yī)藥雜志;2012年11期

3 謝書陽,張敬之,任兆瑞;慢病毒載體與造血干細胞介導的基因治療[J];中國生物工程雜志;2004年10期

4 馬強;李明;董文其;吳英松;;一種新型慢病毒載體制備體系的初步建立[J];生物化學與生物物理進展;2007年08期

5 馬強;李明;董文其;吳英松;;一種新型慢病毒載體制備方法的建立[J];生物工程學報;2007年05期

6 李宏圖;劉曉玉;龐希寧;;神經元抑制性沉默元件雙鏈RNA慢病毒載體的構建與鑒定[J];中國醫(yī)學科學院學報;2009年06期

7 黨寧寧;逄曙光;宋海燕;張敏;王彥;邊勝男;;針對絲聚合蛋白基因RNA干擾重組慢病毒載體的構建及篩選[J];中國現代醫(yī)學雜志;2014年08期

8 羅望;張泓;許淼;顧林;孫倍成;;慢病毒——基因轉移的潛在新載體[J];江蘇藥學與臨床研究;2006年06期

9 彭徐;;慢病毒載體研究進展[J];西昌學院學報(自然科學版);2007年03期

10 張蕊;龔道清;;慢病毒載體的研究進展及應用[J];中國畜牧獸醫(yī);2010年06期

中國重要會議論文全文數據庫 前10條

1 馮東福;畢永延;陳二濤;王永志;楚勝華;;小鼠pLVX-Wnt3a-IRES-ZsGreen1慢病毒載體的構建及神經干細胞轉染[A];中華醫(yī)學會神經外科學分會第九次學術會議論文匯編[C];2010年

2 李振宇;徐開林;潘秀英;陳香梅;鹿群先;主鴻鵠;李慧;陳海英;何徐彭;;慢病毒載體的構建及其包裝細胞系的建立[A];中華醫(yī)學會第八次全國血液學學術會議論文匯編[C];2004年

3 王海彬;;雌激素相關受體α基因超表達慢病毒載體的構建[A];中華醫(yī)學會第六次全國骨質疏松和骨礦鹽疾病學術會議暨中華醫(yī)學會骨質疏松和骨礦鹽疾病分會成立十周年論文匯編[C];2011年

4 張曉宇;秦宜德;王超;張文曉;王巍;何曉光;;牛乳鐵蛋白肽基因的慢病毒載體構建[A];華東六省一市生物化學與分子生物學會2010年學術交流會論文集[C];2010年

5 李振宇;徐開林;潘秀英;鹿群先;;慢病毒載體的構建、改造及其包裝細胞系的建立[A];2005年華東六省一市血液病學學術會議暨浙江省血液病學學術年會論文匯編[C];2005年

6 王玉蘭;任振華;;感染食蟹猴骨髓間充質干細胞的病毒載體研究[A];第十三次全國臨床藥理學學術大會論文匯編[C];2012年

7 黃新鳳;葉金波;蔣英芝;任曉虎;黃培武;劉建軍;;SET shRNA慢病毒載體的構建及其在肝細胞中的表達鑒定[A];中國科協(xié)第十四屆年會第十七分會場環(huán)境危害與健康防護研討會論文集[C];2012年

8 楊龍江;侯健;;構建含有人血小板因子4和其片段的慢病毒載體[A];第12屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2009年

9 李振宇;徐開林;潘秀英;鹿群先;孫海英;主鴻鵠;陳香梅;何徐彭;;慢病毒載體的構建、改造及其包裝細胞系的建立[A];第九屆全國實驗血液學會議論文摘要匯編[C];2003年

10 劉峰;肖興鵬;田玉科;;大鼠蛋白激酶Cγ可控shRNA慢病毒的構建與鑒定[A];2011年全國醫(yī)藥學術論壇交流會暨臨床藥學與藥學服務研究進展培訓班論文集[C];2011年

中國博士學位論文全文數據庫 前10條

1 楊玉芳;用LMP1構建重組慢病毒載體及建立轉基因小鼠模型[D];第一軍醫(yī)大學;2004年

2 徐世永;慢病毒載體法高效轉基因雞制備技術研究[D];南京農業(yè)大學;2007年

3 王玉梅;人PTEN基因RNAi和RESC慢病毒載體的構建及其功能的相關性研究[D];鄭州大學;2011年

4 吳福國;表達Cdc42-shRNA重組慢病毒載體的構建及其對膀胱癌細胞影響的實驗研究[D];蘭州大學;2007年

5 馬強;腫瘤翻譯調控蛋白（TCTP）對結腸癌細胞LoVo的生物學特性影響及安全型慢病毒載體構建探索[D];南方醫(yī)科大學;2009年

6 郝又國;攜帶Rab9 cDNA的慢病毒對C型Niemann-Pick病小鼠的神經保護作用[D];華中科技大學;2009年

7 楊歡;慢病毒介導中國人產甲酸草酸桿菌中草酸分解基因FRC和OXC轉染肝干細胞的實驗研究[D];華中科技大學;2011年

8 張文卿;HCMV pp150表達及E1-pp65慢病毒載體刺激T細胞免疫應答的研究[D];山東大學;2006年

9 林元邦;改進型復制缺陷性腺病毒（HDAd）轉基因載體特異性及穩(wěn)定性研究[D];天津醫(yī)科大學;2012年

10 原莉莉;慢病毒載體介導的HSP47 siRNA抑制PVR的研究[D];天津醫(yī)科大學;2015年

  本文關鍵詞：LV-calb2和LV-siRNA-calb2慢病毒載體的構建及其在睪丸間質細胞的表達，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：403451