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重組腺病毒介導(dǎo)的綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)染對兔脂肪干細胞生長增殖及成脂分化的影響

發(fā)布時間:2017-05-28 00:09

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【摘要】:目的:探討攜帶綠色熒光蛋白的腺病毒載體(Ad-GFP)轉(zhuǎn)染兔脂肪干細胞(rADSCs)后對其生長增殖及成脂分化的影響。方法:取新西蘭大白兔(1.5~2.0kg、8~12周齡)腹股溝皮下脂肪墊3mL,采用貼壁法體外分離培養(yǎng)rADSCs。取第3代rADSCs細胞分為Ad-GFP轉(zhuǎn)染組(A組)和未轉(zhuǎn)染的對照組(B組),流式細胞術(shù)檢測Ad-GFP轉(zhuǎn)染rADSCs的效率。比色法檢測兩組細胞上清液中乳酸脫氫酶(LDH)的活性,四氮唑復(fù)合物(XTT)比色法檢測rADSCs的增殖情況。細胞成脂分化14d后行油紅O染色,檢測脂肪細胞分化率及細胞內(nèi)脂滴含量。結(jié)果:兩組rADSCs表面標志物CD29、CD44、CD90、CD105陽性表達率均在95%以上。不同MOI值rADSCs轉(zhuǎn)染效率不同,當MOI值為10、30、50、100時轉(zhuǎn)染效率分別為11.2%、42.7%、95.3%、97.1%。Ad-GFP轉(zhuǎn)染后的rASCs貼壁后呈梭形,細胞質(zhì)豐富,保持了良好的正常形態(tài)。兩組rASCs培養(yǎng)上清液中LDH含量及rADSCs增殖情況比較,差異均無統(tǒng)計學意義(均P0.05)。兩組細胞分化率和細胞內(nèi)脂滴含量比較,差異均無統(tǒng)計學意義(均P0.05)。結(jié)論:Ad-GFP轉(zhuǎn)染rADSCs后,GFP可在細胞內(nèi)穩(wěn)定表達,對細胞無明顯毒性作用,不影響rADSCs的生長、增殖及成脂化能力,是一種理想的脂肪干細胞示蹤標記方法。
【作者單位】: 廣西醫(yī)科大學第五附屬醫(yī)院肝膽腺體外科;廣西醫(yī)科大學第五附屬醫(yī)院檢驗醫(yī)學中心;廣西醫(yī)科大學第五附屬醫(yī)院整形美容外科;
【關(guān)鍵詞】脂肪干細胞 重組腺病毒綠色熒光蛋白 細胞標記 細胞增殖 細胞分化
【基金】:國家自然科學基金資助項目(No.81560316,81560358) 廣西科學研究與技術(shù)開發(fā)計劃資助項目(桂科攻1598012-1) 南寧市科學研究與技術(shù)開發(fā)計劃資助項目(No.20153089,zc20153002)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 脂肪干細胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是在脂肪組織的血管基質(zhì)片段(SVF)中發(fā)現(xiàn)的一類間充質(zhì)干細胞,具有較強的傳代增殖能力和免疫耐受性等特點,它源于中胚層,來源豐富且易于分離,具有多向分化(成脂、成骨、成軟骨等)能力以及旁分泌、免疫調(diào)節(jié)等功能,適用于多種治療用

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 朱艷霞;劉天慶;宋克東;馬學虎;崔占峰;;心肌樣微環(huán)境誘導(dǎo)脂肪干細胞分化的研究[J];生物化學與生物物理進展;2009年05期

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9 張s,

本文編號:401490


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