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ASK1巰基亞硝基化對(duì)其活性的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-05-27 23:02

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【摘要】:目的在HEK293細(xì)胞中研究ASK1巰基亞硝基化對(duì)其活性的影響。方法獲得ASK1真核表達(dá)載體及其869位半胱氨酸突變體,利用脂質(zhì)體2000高效轉(zhuǎn)染至HEK293細(xì)胞。轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞與外源性NO供體GSNO作用,樣品用生物素轉(zhuǎn)化法檢測(cè)過(guò)表達(dá)ASK1的巰基亞硝基化,WB檢測(cè)ASK1磷酸化(活化)。結(jié)果過(guò)表達(dá)的HEK293細(xì)胞給予GSNO處理可以使ASK1發(fā)生巰基亞硝基化,同時(shí)磷酸化升高;Cys869被鑒定為ASK1亞硝基化位點(diǎn),將其突變?yōu)楸彼岷?GSNO處理ASK1巰基亞硝基化顯著降低,同時(shí)抑制了ASK1的磷酸化水平升高。結(jié)論外源性NO使ASK1發(fā)生巰基亞硝基化,ASK1的巰基亞硝基化能升高其磷酸化水平,從而激活A(yù)SK1。
【作者單位】: 徐州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】ASK NO 巰基亞硝基化 活化
【分類號(hào)】:R363
【正文快照】: 一氧化氮(NO)是一種易擴(kuò)散,的生物活性小分子,它不僅參與了眾多的生理過(guò)程也參與了一些病理過(guò)程,包括平滑肌的細(xì)胞分化、松弛、神經(jīng)遞質(zhì)的釋放、凋亡、神經(jīng)毒和細(xì)胞增殖等[1]。其中,NO的重要功能之一是可以激活胞內(nèi)可溶性鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶,從而增加信使c GMP的含量。此外,NO還可以

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本文編號(hào):401350

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