目的:探討骨形態(tài)發(fā)生蛋白9(BMP9)與神經(jīng)生長因子(NGF)聯(lián)合處理對間充質(zhì)干細胞(MSCs)骨向分化的影響。方法:以重組腺病毒法將BMP9導入C3H10T1/2細胞,構(gòu)建MSCs骨向分化實驗模型,設(shè)定分組為綠色熒光(GFP)對照組、NGF單獨處理組、BMP9單獨處理組以及BMP9+NGF聯(lián)合處理組,分別在處理3 h、12 h、24 h、48 h、3 d、7 d后檢測早期成骨分化標志物I型膠原、Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(RUNX2)和堿性磷酸酶(ALP)在細胞中的表達。檢測方法采用ALP染色、實時定量RTPCR檢測mRNA轉(zhuǎn)錄水平以及Western blot檢測蛋白表達。結(jié)果:BMP9+NGF組較各單獨處理組ALP活性顯著增加,I型膠原、RUNX2的mRNA水平在BMP9+NGF組的表達明顯高于其他各單獨處理組,且各組在3 h即出現(xiàn)顯著差異;RUNX2蛋白在各實驗組均表達,BMP9+NGF組表達最高。結(jié)論:BMP9聯(lián)合NGF在成骨誘導間充質(zhì)干細胞分化早期,協(xié)同促進其骨向分化。

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