本文關(guān)鍵詞：GⅡ.4諾如病毒抗原ELISA定量檢測(cè)方法的建立及其應(yīng)用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的建立GⅡ.4諾如病毒(Norovirus,No V)抗原ELISA定量檢測(cè)方法,用于重組GⅡ.4 No V病毒樣顆粒疫苗研制中抗原含量檢測(cè)。方法使用純化的GⅡ.4 No V病毒樣顆粒作為免疫原,分別免疫新西蘭大白兔和豚鼠,制備抗血清。以豚鼠抗GⅡ.4病毒樣顆粒多抗作為包被抗體,HRP標(biāo)記的兔抗GⅡ.4病毒樣顆粒多抗作為檢測(cè)抗體,建立GⅡ.4 No V抗原ELISA定量檢測(cè)方法,確定該方法的線性范圍,并對(duì)該方法的準(zhǔn)確度、精密度、穩(wěn)定性、特異性進(jìn)行驗(yàn)證;用建立的方法檢測(cè)GⅡ.4病毒樣顆粒制備過(guò)程中間品的抗原含量。結(jié)果 GⅡ.4病毒樣顆粒內(nèi)部參考品在15.6~250 ng/ml范圍內(nèi),線性關(guān)系良好,R20.98,高、中、低3個(gè)濃度樣品回收率在90.9%~110.2%之間,板內(nèi)和板間精密度試驗(yàn)的CV值均不超過(guò)15%;包被微孔板37℃放置6 d,穩(wěn)定性試驗(yàn)的CV值均小于15%;與GⅡ.4No V病毒樣顆粒之外的抗原均無(wú)交叉反應(yīng);可用于定量檢測(cè)重組No V抗原制備過(guò)程中不同階段樣品。結(jié)論建立了GⅡ.4 No V抗原ELISA定量檢測(cè)方法,該方法準(zhǔn)確度、精密度、穩(wěn)定性、特異性、適用性均良好,為No V病毒樣顆粒疫苗的研制提供了質(zhì)控方法。
【作者單位】： 武漢生物制品研究所有限責(zé)任公司病毒性疫苗研究一室;
【關(guān)鍵詞】： GⅡ.諾如病毒 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) 定量檢測(cè)
【分類(lèi)號(hào)】：R392-33
【正文快照】： 諾如病毒(Norovirus,No V)是目前引起非細(xì)菌性急性腸胃炎的主要病原體之一,這種病毒具有較高的感染性[1-2],主要通過(guò)人與人之間的糞口途徑傳播,同時(shí)也通過(guò)污染的食物及污水造成人群密集地方的集體暴發(fā)。據(jù)估算,全世界每年有22萬(wàn)5歲以下兒童因No V感染而死亡[3]。No V屬于杯狀

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本文編號(hào)：400591