手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)是一種由多種腸道病毒引起的急性傳染病,主要感染5歲以下嬰幼兒,臨床表現(xiàn)為手、足、口等部位發(fā)生皮疹、皰疹,嚴(yán)重時可導(dǎo)致腦干腦炎、無菌性腦膜炎、肺水腫甚至死亡。腸道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)和柯薩奇病毒 A 組 16 型(Coxsackievirus A16,CA16)為引起手足口病的兩種主要病原體。以往的報道顯示,手足口病的嚴(yán)重病例主要由EV71引起,但越來越多的流行病學(xué)調(diào)查表明,CA16引起的癥狀不再是溫和的,也可引起嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥,甚至導(dǎo)致死亡。目前CA16疫苗的研究還沒有取得突破性進展,尚無進入臨床試驗階段的報導(dǎo),并且EV71疫苗對CA16感染也沒有保護作用。因此,CA16疫苗對手足口病的全面防控具有重要的意義。減毒活疫苗的研究是CA16疫苗研究的一個方向,而凍干劑型的是又是研究的重點。因此,本論文主要針對CA16減毒活疫苗生產(chǎn)的抽提純化工藝、凍干工藝等關(guān)鍵工藝進行深入研究,并對抽提純化工藝和凍干工藝進行系統(tǒng)評價,為今后凍干CA16減毒性疫苗的研發(fā)奠定基礎(chǔ)。氯仿抽提純化工藝結(jié)...

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１病毒液與氯仿不同體積比ＰＢＳ洗滌上清樣品病毒感染性滴度??１：?ＣＡ１６病毒原液；２：氯仿抽提后上清液；３：?ＰＢＳ洗滌第１次后上清液；４：?ＰＢＳ洗滌第２次后??

滌次數(shù)的增多，其病毒含量逐漸降低，但在洗滌第５次時上清樣中病毒感染性滴度仍??為４．２５?ｌｇＣＣＩＤ５〇／ｍｌ?￣４．７５?ＩｇＣＣ丨Ｄ５０／ｍｌ，一抽五洗后混合液中的病毒感染性滴度為??７．１２５?ＩｇＣＣｌＤＷｍ卜７．７５?ＩｇＣＣＩＤＷｍｌ?（如圖１所示）。病毒液與氯仿按....

圖３氯仿一抽多洗樣品中蛋白含量的測定結(jié)果??１：氯仿抽提后上清；２：?：?ＰＢＳ洗滌第１次后上清液；３：?ＰＢＳ洗滌第２次后上清液；４：?ＰＢＳ洗??

行一抽多洗后混合液中蛋白含量的檢測。蛋白含量結(jié)果顯示，氯仿抽提可以大大降??低殘余蛋白含量，ＰＢＳ洗滌第２次的上清液中蛋白含量極低為５１．１３?ｙｇ／ｍ丨？６８．９８?ｕ??ｇ／ｍｌ?（如圖３所示）；而病毒液與氯仿三個不同體積比對蛋白去除率沒有明顯影響，??２４??

圖6不同組分含明膠保護劑凍干產(chǎn)品圖

■凍干前病毒感染性滴虔?■凍干后病毒感染性滴虔??Ｅｔｔｌ?Ｕ?ｆ?ｔ??ＩＥ：?ｊ??Ｉ：：?■■■■■■＿．??ｉ?ｎ?ｉｎ?ｉｖ?ｖ?ｖｉ?ｖｎ??圖５不同組分含明膠保護劑凍干樣品滴度降結(jié)果??Ｆｉｇ．５．?Ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｍｐｏｎｅｎ....

圖9不同組分無明膠保護劑凍干產(chǎn)品圖

■凍干前病毒感染性滴度?■凍干后病毒感染性滴度??〇?２．７５??Ｅ?９．００「｜?Ｉ?３?１３?”Ｓ?１３８??Ｉ８＇００?ｒ－ｎ?＾３?Ｐｎ?２〇〇??麵?ｌｉｒｎｍ??ＡＢＣＤＥＦＧＨ??圖８不同組分無明膠保護劑凍干后樣品的滴度降結(jié)果??Ｆｉｇ．８．?Ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ....

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