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樹鼩免疫細(xì)胞交叉反應(yīng)性抗體篩選與表型分析

發(fā)布時(shí)間:2024-05-23 04:31
  目的:樹鼩是一種小型哺乳動(dòng)物,屬攀鼩目、樹鼩科。樹鼩的親緣關(guān)系與靈長類很接近,其實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果易于應(yīng)用到人類的醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究當(dāng)中。科學(xué)家們成功地馴化和培育了一定數(shù)量的樹鼩,并廣泛用于疾病模型的建立。同時(shí),還建立了一系列有關(guān)樹鼩作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的標(biāo)準(zhǔn)。免疫系統(tǒng)在機(jī)體抵抗外界環(huán)境中各類微生物、毒素和致癌物質(zhì)等方面都起著非常重要的作用,免疫應(yīng)答的監(jiān)測(cè)是動(dòng)物模型應(yīng)用中不可缺少的部分。而樹鼩免疫系統(tǒng)信息的缺乏,導(dǎo)致我們不能深入地研究疾病的致病機(jī)理,以及研究疾病的防治措施。因此,對(duì)于樹鼩的免疫系統(tǒng)的研究與分析顯得尤為重要,本文主要對(duì)樹鼩免疫細(xì)胞表型進(jìn)行分析和研究。方法:1.比較四種試劑裂解樹鼩外周血紅細(xì)胞的效果,然后選取可以使細(xì)胞成群分布、分界明顯,而且紅細(xì)胞裂解更為完全的裂解液,對(duì)其進(jìn)行優(yōu)化,包括裂解液與全血的體積比、單次裂解時(shí)間、裂解次數(shù)和外周血起始體積等。2.基于“針對(duì)某一種屬抗原的抗體可能存在與其它種屬的同類抗原的交叉反應(yīng)性”,我們從商業(yè)化的抗體中進(jìn)行抗體篩選。通過流式細(xì)胞分析進(jìn)行抗體的交叉反應(yīng)性分析,找出反應(yīng)性最強(qiáng)的抗體克隆。3.利用篩選出的具有交叉反應(yīng)性的抗體對(duì)樹鼩免疫細(xì)胞表型進(jìn)行分析。通過...

【文章頁數(shù)】:117 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.樹齣研宄現(xiàn)狀與展望??Figure?1.?Progress?and?prospects?of?tree?shrew?research??

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神經(jīng)系統(tǒng)I7]、視覺系統(tǒng)[8]、動(dòng)物模型和分類學(xué)[1G]等方面己經(jīng)進(jìn)行了大量的研究,??并且有了較為全面和深入的了解,而在基因克隆和功能[u,12]以及感染和免疫學(xué)⑴]??等領(lǐng)域的還需要進(jìn)一步深入研究(圖1)。近年來,對(duì)樹駒的研究呈現(xiàn)出較為全??面、快速的現(xiàn)象,可以預(yù)見樹駒將會(huì)在....


圖2.1樹齣組織細(xì)胞流式分析模式圖??Figure?1.3?Structure?diagram?of?cells?from?tree?shrew?analyzed?via?flow?cytometry??

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100?P1,一84ul(液)里加入16?ul抗體,然后從第一管樣品中取出50?ul加入第二管的50?ul稀??釋液中,接下來從第二管中取出50?ul加入至第三管的50?ul稀釋液中,最后從??第三管中取出50?y丨加入至第四管的50?p?1稀釋液中。最后向每個(gè)管中加入50?u?....


圖2.10a)

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在吉母薩染色實(shí)驗(yàn)中,與未標(biāo)記PE熒光抗體的樣品相比,磁珠分選后的??CD20+細(xì)胞樣品中,具有比例較高的高核質(zhì)比細(xì)胞,但磁珠分選出的樹駒CD20+??細(xì)胞較少(圖2.11)。??PE?DAPI?Merge??■■■??unstained!?;?.??Before?、?!?;?::....


圖2.10磁珠分選后免疫熒光檢測(cè)??Figure?2.10?Immunofluorescence?detection?after?magnetic?separation??注:a小鼠脾臟(20X),b樹駒脾臟(20X)

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*?*??圖2.11樹駒骨髓樣品磁珠分選后吉母薩分析??Figure?2.11?Gemma?staining?of?bone?marrow?sample?from?tree?threw?after?magnetic?separation??注:a.unstained?樣品(100....



本文編號(hào):3981004

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