發(fā)布時(shí)間：2017-05-26 20:08

  本文關(guān)鍵詞：埃博拉病毒重組膜蛋白Gp-Fc表達(dá)及免疫原性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本研究利用HEK293F細(xì)胞表達(dá)了埃博拉病毒重組膜蛋白,并通過免疫小鼠初步研究了其免疫原性。按照人密碼子使用頻度優(yōu)化編碼埃博拉病毒膜蛋白胞外區(qū)基因,合成后將其插入到真核表達(dá)載體pXG-Fc中,構(gòu)建埃博拉病毒糖蛋白和人IgG Fc片段融合蛋白表達(dá)質(zhì)粒pXG-modGP-Fc。利用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染技術(shù),將融合蛋白表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到高密度培養(yǎng)的懸浮HEK293F細(xì)胞中,實(shí)現(xiàn)了分泌表達(dá)。通過Protein A親和層析,得到了純化的重組蛋白。將純化的融合蛋白免疫小鼠,并通過間接ELISA對(duì)小鼠抗體效價(jià)進(jìn)行評(píng)價(jià)。蛋白純化及分析結(jié)果表明,本研究構(gòu)建的真核表達(dá)系統(tǒng)能夠有效表達(dá)埃博拉重組蛋白GP-Fc,細(xì)胞培養(yǎng)上清中重組蛋白以二聚體形式存在。通過間接ELISA分析,純化的重組蛋白免疫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物后,可以在血清中檢出高滴度的抗原特異性IgG,顯示該重組蛋白具有良好的免疫原性。通過該研究,我們得到了具有良好免疫原性的重組蛋白,同時(shí),該工作為研制基于重組蛋白的埃博拉疫苗以及篩選單克隆抗體打下基礎(chǔ)。
【作者單位】： 中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所衛(wèi)生部醫(yī)學(xué)病毒和病毒病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;北京工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與生物工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 埃博拉病毒 疫苗 糖蛋白 免疫原性
【基金】：艾滋病和病毒性肝炎等重大傳染病防治項(xiàng)目:重大傳染病應(yīng)急處置檢測(cè)技術(shù)平臺(tái)(2013ZX1004-101);埃博拉出血熱防控應(yīng)急研究(1061400100275)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 埃博拉病毒(Ebola Virus,EBOV)于1976年在蘇丹和剛果共和國被首次發(fā)現(xiàn)后,在非洲多次暴發(fā)小規(guī)模疫情,但是因?yàn)槊看蝹鞑シ秶?時(shí)間短,沒有造成大量人員感染和死亡,沒有引起足夠重視。2014年始于西非的埃博拉疫情[1],是埃博拉病毒被發(fā)現(xiàn)以來最為嚴(yán)重的一次,據(jù)WHO統(tǒng)計(jì),目前已經(jīng)超

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