負(fù)載pVAX1-wapA的殼聚糖及季銨化殼聚糖納米粒的制備研究
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【摘要】:目的制備負(fù)載抗齲DNA疫苗pVAX1-wapA質(zhì)粒的殼聚糖和季銨化殼聚糖納米粒,優(yōu)化其制備工藝,測定其細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率。方法以包封率和粒徑為主要指標(biāo),單因素法考察載體濃度、pH值、N/P、TPP濃度等因素的影響,RealtimePCR檢測細(xì)胞對質(zhì)粒編碼蛋白的轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平以評價(jià)載質(zhì)粒納米粒的促轉(zhuǎn)染作用。結(jié)果制得的載DNA疫苗納米粒粒徑均一,形態(tài)圓整。殼聚糖(CS)納米粒粒徑為(219.2±18.2)nm,Zeta電位為(24.7±3.5)mV,包封率為91.24%。季銨化殼聚糖(CSTM)納米粒粒徑為(222.5±15.6)nm,Zeta電位為(19.6±1.2)mV,包封率為87.66%。納米粒可以促進(jìn)pVAX1-wapA進(jìn)入細(xì)胞,并成功被轉(zhuǎn)錄。結(jié)論制備的包載pVAX1-wapA的季銨化殼聚糖納米?捎糜谥亟M基因疫苗的運(yùn)送。
【作者單位】: 第二軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: DNA疫苗 殼聚糖納米粒 wapA蛋白 轉(zhuǎn)染 季銨化殼聚糖
【分類號】:R392;TB383.1
【正文快照】: 85%,Mr=50 000~190 000,sigma);瓊脂糖(上海生工生物有限公司);溴化乙啶(EB,上海浩然科技有限公司分裝);DNAmarker[DL5000,大連寶生物(TAKARA)公司];季銨化殼聚糖(CSTM,實(shí)驗(yàn)室合成[10,11],季銨化程度為52%);質(zhì)粒DNA(由本實(shí)驗(yàn)室提取);Hoechst 33258(碧云天生物技術(shù)研究所);Triz
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本文編號:397258
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