丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus，HCV）是引起慢性肝病的主要病原體，目前全球約有1.7億HCV感染者。由于HCV的高度變異性，至今尚無特異有效的疫苗和治療藥物，因而其感染已成為全球性的嚴重的公共衛(wèi)生問題之一。 自1989年首次分離和鑒定出HCV至今，對HCV的防治研究一直進展緩慢。其原因主要是由于HCV感染高度嚴格的種屬嗜性導致有效、穩(wěn)定的實驗動物模型的缺乏。這不僅嚴重阻礙了對HCV感染和致病機制的研究，而且也極大地限制了抗病毒藥物和疫苗的開發(fā)。 HCV基因組RNA編碼的NS3/4A蛋白具有絲氨酸蛋白酶和解旋酶活性。體外實驗研究表明，HCV NS3/4A蛋白在蛋白前體的加工成熟、RNA復制以及病毒裝配等過程中發(fā)揮著關鍵作用。因此，NS3/4A蛋白已成為目前抗HCV藥物研發(fā)中最為重要的靶點之一。不僅如此，NS3/4A絲氨酸蛋白酶靶向作用于感染細胞內非病毒復制相關的宿主蛋白，通過阻礙干擾素合成信號的傳遞等介導病毒的免疫逃逸與感染慢性化。這提示，靶向NS3/4A絲氨酸蛋白酶的抑制劑可能具備阻斷感染細胞內病毒的復制和恢復感染細胞內固有免疫防御應答的雙重作用。 為了進一步在動物...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1質粒pTet-On示意圖

正文構建Tet-On和Cre/LoxP系統(tǒng)雙表達HCVNS3/4A蛋白的真核表控系統(tǒng)質粒pTet-On及pBI-G由德國海德堡大；重組質粒pBluescript-ⅡSK-LoxP-FLuc-BGHA及pBI-G//Cre由本課題組趙亞博士、....

圖1-2質粒pBI-G示意圖

圖1-2質粒pBI-G示意圖Fig.1-2RestrictionmapofplasmidpBI-G胞系菌（E.coli）HB101株由本室保存。由本室保存。主要工具酶及相關試劑收試劑盒、質粒小量提取試劑盒等購自天根公提取、純化試劑盒購自Promega公司....

圖1-3pBI--G//LoxP-FLuc-BGHPolyA-LoxP-NS3/4A的構建示意圖

第四軍醫(yī)大學碩士學位論文，得到pBI--G//LoxP-FLuc-BGHPolyA-LoxP-NS3n系統(tǒng)單獨調控時轉錄產(chǎn)生含F(xiàn)luc編碼序列的mRCre/LoxP系統(tǒng)調控時，Cre重組酶特異性剪接Lo動子啟動轉錄后產(chǎn)生的mRNA包含NS3/A蛋白....

圖1-4重組質粒pBI--G//LoxP-FLuc-BGHPolyA-LoxP-NS3/4A的酶切鑒定

質粒pBI--G//LoxP-FLuc-BGHPolyA-LoxP-NS3/4AedigestionanalysisofpBI--G//LoxP-FLuc-BGHPoly5000DNAMarker；M1：500~12000DNAwiderange....

本文編號：3966225