目的:初步探討血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)/血管緊張素Ⅱ1型受體(angiotensinⅡtype1 receptor,AT₁R)通路是否通過激活人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)導(dǎo)致內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)Ser1177磷酸化水平下調(diào)。方法:將人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞隨機(jī)分為正常對照(control)組、AngⅡ處理組、單純坎地沙坦(candesartan,CAN;AT₁R特異性阻斷劑)組和CAN預(yù)處理+AngⅡ組。用Western blot方法檢測各組eNOS總蛋白表達(dá)、eNOS Ser1177磷酸化水平、PP2Ac蛋白表達(dá)、PP2Ac-Tyr307磷酸化水平和PP2A內(nèi)源性抑制蛋白I₂^PP2A表達(dá)水平。采用化學(xué)比色法檢測各組細(xì)胞培養(yǎng)基中的NO含量。結(jié)果:與control組相比,AngⅡ處理后eNOS Ser1177磷酸化水平及細(xì)胞培養(yǎng)基中的NO含量降低(P<0.05);與同一濃度AngⅡ組相比,CAN預(yù)處理可增加e...

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【文章目錄】：
材料和方法
    1 實驗試劑及儀器
    2 主要方法
        2.1 HUVECs細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2 細(xì)胞鑒定
        2.3 實驗分組
        2.4 Western blot檢測蛋白水平
        2.5 各組培養(yǎng)基中NO含量檢測
    3 統(tǒng)計分析
結(jié)果
    1細(xì)胞鑒定結(jié)果
    2 CAN預(yù)處理對AngⅡ刺激HUVECs后e NOS蛋白表達(dá)和e NOS Ser1177磷酸化水平的影響
    3 各組培養(yǎng)基中NO的含量
    4 CAN預(yù)處理對AngⅡ刺激HUVECs后PP2Ac蛋白表達(dá)和PP2Ac Tyr307磷酸化水平的影響
    5 CAN預(yù)處理對AngⅡ刺激HUVECs后PP2A內(nèi)源性抑制蛋白I2PP2A表達(dá)的影響
討論
    1 AngⅡ下調(diào)e NOS Ser1177磷酸化水平由AT1R介導(dǎo)
    2 AngⅡ/AT1R通路激活HUVECs中PP2A可能的分子機(jī)制



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