發(fā)布時間：2024-03-30 05:28

　　目的觀察微小RNA-374-5p(miR-374-5p)對大鼠垂體泌乳素腺瘤細胞系MMQ增殖、凋亡、侵襲的影響,并探討其作用機制。方法將對數(shù)生長期MMQ細胞分為A、B、C、D組。A組加入常規(guī)培養(yǎng)基,B組加入miR-374-5p類似物,C組加入miR-374-5p抑制劑,D組加入miR-374-5p類似物和miR-374-5p抑制劑。各組培養(yǎng)0、24、48、72 h時,酶標(biāo)儀在490 nm波長處檢測各組細胞光密度值(OD值,以O(shè)D值表示細胞增殖能力)。各組細胞培養(yǎng)72 h時,離心收集細胞,加入Annexin V-FITC和PI染色,流式細胞儀檢測Annexin V染色陽性細胞百分?jǐn)?shù)和PI染色陽性細胞百分?jǐn)?shù)(以Annexin V染色陽性細胞百分?jǐn)?shù)和PI染色陽性細胞百分?jǐn)?shù)表示細胞凋亡能力)。各組細胞培養(yǎng)72 h時,采用實時定量PCR法檢測各組細胞侵襲相關(guān)基因[E-鈣黏蛋白(E-cadherin)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、N-鈣黏蛋白(N-cadherin)、蝸牛家族轉(zhuǎn)錄阻遏物1(Snail)、波形蛋白(Vimentin),以侵襲相關(guān)基因mRNA的相...

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細胞及試劑
    1.2 細胞分組及處理
    1.3 各組細胞增殖能力觀察
    1.3 各組細胞凋亡能力觀察
    1.4 各組細胞侵襲相關(guān)基因及垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因(PTTG)mRNA檢測
    1.5 miR-374-5p靶基因驗證
    1.6 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 各組細胞增殖能力比較
    2.2 各組細胞凋亡能力比較
    2.3 各組細胞侵襲相關(guān)基因mRNA及PTTG mR-NA相對表達量比較
    2.4 miR-374-5p靶基因驗證結(jié)果
3 討論



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