本文關(guān)鍵詞：P小體相關(guān)蛋白MOV10結(jié)合于EV71基因組5’UTR并調(diào)控病毒復(fù)制，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：腸道病毒EV71是手足口病的主要病原體之一,其基因組為單鏈正股RNA,在感染過程中病毒RNA復(fù)制和翻譯過程通常會受到宿主細(xì)胞內(nèi)RNA代謝相關(guān)蛋白的影響。在本研究中,我們首次發(fā)現(xiàn)宿主細(xì)胞內(nèi)的P小體相關(guān)蛋白MOV10在EV71感染過程中發(fā)揮重要作用：敲除細(xì)胞內(nèi)的MOV10蛋白后,EV71在宿主細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制和翻譯均被明顯抑制；一定劑量范圍內(nèi)過表達(dá)MOV10蛋白可以促進(jìn)EV71的復(fù)制,然而隨著表達(dá)劑量的遞增,過量的MOV10會反過來限制病毒復(fù)制。進(jìn)一步的研究表明,MOV10可以分別結(jié)合在EV71基因組5’UTR區(qū)域的三葉草結(jié)構(gòu)和IRES結(jié)構(gòu),進(jìn)而影響病毒復(fù)制。有趣的是,我們發(fā)現(xiàn)過表達(dá)MOV10蛋白的N端可以顯著抑制EV71蛋白水平的表達(dá),預(yù)示MOV10蛋白在EV71感染中的雙重作用。此外,我們還發(fā)現(xiàn),MOV10在病毒感染過程中可以與核蛋白TDP43,FUS以及HuR在細(xì)胞質(zhì)中發(fā)生共定位,提示MOV10可能通過與其他宿主蛋白的相互作用來完成對EV71感染過程的調(diào)控。
【關(guān)鍵詞】：手足口病 EV71病毒 MOV10蛋白 解旋酶 三葉草結(jié)構(gòu) 內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn) P小體 應(yīng)激顆粒 RNA結(jié)合蛋白
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R373
【目錄】：

• 縮略語4-7
• 中文摘要7-8
• Abstract8-9
• 第一章 文獻(xiàn)綜述9-21
• 1.1 EV71概述9-16
• 1.1.1 手足口病簡介9
• 1.1.2 EV71流行病學(xué)調(diào)查9-10
• 1.1.3 EV71的結(jié)構(gòu)與相關(guān)功能10-12
• 1.1.4 EV71基因組5'UTR對自身復(fù)制與翻譯的調(diào)控12-13
• 1.1.5 EV71的生活周期13-14
• 1.1.6 EV71與宿主免疫14-15
• 1.1.7 EV71的疫苗研究15
• 1.1.8 EV71的動物模型15-16
• 1.2 MOV10與P小體概述16-21
• 1.2.1 P小體簡介16
• 1.2.2 P小體與病毒感染16-18
• 1.2.3 MOV10簡介18-19
• 1.2.4 MOV10與病毒感染19-21
• 第二章 MOV10在EV71感染過程中的功能研究21-49
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料21-24
• 2.1.1 細(xì)胞系和EV71毒株21
• 2.1.2 抗體21
• 2.1.3 質(zhì)粒和質(zhì)粒轉(zhuǎn)染21-22
• 2.1.4 siRNA和RNA干擾22
• 2.1.5 統(tǒng)計(jì)22
• 2.1.6 主要實(shí)驗(yàn)試劑配制22-23
• 2.1.7 其他試劑23-24
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法24-29
• 2.2.1 MOV10 C端和N端質(zhì)粒的構(gòu)建24-25
• 2.2.2 質(zhì)粒與siRNA轉(zhuǎn)染25-26
• 2.2.3 Western Blot26
• 2.2.4 RNA提取和Real-time26-28
• 2.2.5 免疫共沉淀28
• 2.2.6 生物素標(biāo)記實(shí)驗(yàn)與RNA pull down實(shí)驗(yàn)28-29
• 2.2.7 免疫熒光實(shí)驗(yàn)29
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-47
• 2.3.1 宿主細(xì)胞內(nèi)MOV10蛋白促進(jìn)EV71復(fù)制29-32
• 2.3.2 梯度過表達(dá)MOV10蛋白對EV71復(fù)制的影響32-33
• 2.3.3 MOV10結(jié)合于EV71的5'UTR區(qū)域33-37
• 2.3.4 MOV10可與EV71三葉草結(jié)構(gòu)和IRES結(jié)構(gòu)結(jié)合,并影響病毒復(fù)制37-42
• 2.3.5 MOV10蛋白的C端與N端對EV71復(fù)制具有不同影響42-43
• 2.3.6 MOV10在EV71感染后與TDP43,FUS以及HuR發(fā)生共定位43-45
• 2.3.7 EV71感染過程中宿主細(xì)胞內(nèi)P小體以及MOV10所受影響45-47
• 2.4 討論47-49
• 參考文獻(xiàn)49-56
• 碩士在讀期間科研成果56-57
• 致謝57-58

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 李莉;鐘海燕;樊茂;奎莉越;李惠英;張建英;;參與EV71復(fù)制的宿主因素hnRNP K、RTN3的分子作用機(jī)制研究進(jìn)展[J];病毒學(xué)報(bào);2015年02期

2 Megha Haridas Upadya;Jude Juventus Aweya;Yee-Joo Tan;;Understanding the interaction of hepatitis C virus with host DEAD-box RNA helicases[J];World Journal of Gastroenterology;2014年11期

  本文關(guān)鍵詞：P小體相關(guān)蛋白MOV10結(jié)合于EV71基因組5’UTR并調(diào)控病毒復(fù)制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：390591