Latexin是一個(gè)由222個(gè)氨基酸組成的分子量約為29kD的蛋白質(zhì)。它是哺乳動(dòng)物中唯一已知的羧肽酶抑制劑。目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)于Latexin的功能大部分集中在神經(jīng)與發(fā)育以及腫瘤相關(guān)研究中,而對(duì)于炎癥方面的研究非常缺乏且機(jī)制相當(dāng)不明確,因此我們以Latexin在腫瘤細(xì)胞炎癥反應(yīng)中的作用為切入點(diǎn)進(jìn)行研究。本論文主要包括以下內(nèi)容:第一章,前言。第二章,通過(guò)Western Blot、免疫組織化學(xué)和細(xì)胞免疫熒光技術(shù),分析了Latexin在體外培養(yǎng)細(xì)胞系和體內(nèi)不同組織的分布與表達(dá)規(guī)律。第三章,通過(guò)蛋白質(zhì)組學(xué)策略,進(jìn)行Latexin蛋白質(zhì)復(fù)合物的鑒定,并運(yùn)用免疫沉淀及細(xì)胞免疫熒光技術(shù),驗(yàn)證相互作用蛋白。第四章,Latexin抗炎機(jī)制研究。通過(guò)雙螢光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)和qRT-PCR,我們發(fā)現(xiàn)Latexin過(guò)表達(dá)抑制NF-?B-Luc活性以及抑制TNF-α誘導(dǎo)的炎癥因子表達(dá)(如ICAM1、VCAM1、IL-6等),表明Latexin可以抑制炎癥反應(yīng);通過(guò)細(xì)胞免疫熒光和EMSA實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)Latexin抑制TNF-α誘導(dǎo)的p65核轉(zhuǎn)移及DNA binding活性;由于p65核轉(zhuǎn)移受I?Bα調(diào)控,通過(guò)在細(xì)胞中轉(zhuǎn)...

【文章頁(yè)數(shù)】：86 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.MouseLatexin三級(jí)結(jié)構(gòu)（http://www.rcsb.org/3d-view/1WNH）

結(jié)構(gòu)及其基因染色體定位由222個(gè)氨基酸組成的分子量約為29kD的蛋白質(zhì)，是（它是一種幾乎不可逆的，非競(jìng)爭(zhēng)性和有效的羧肽酶A1（CPA1）、羧肽酶A2（CPA2）和肥大細(xì)胞羧肽CPB）具有較少的抑制活性，并且對(duì)各種其他蛋白酶類CPA4結(jié)合并形成復(fù)合物[4]。有意思的....

圖2.Latexin基因在小鼠3號(hào)染色體上的圖譜,引自文獻(xiàn)[8]

圖2.Latexin基因在小鼠3號(hào)染色體上的圖譜,引自文獻(xiàn)[8]在神經(jīng)系統(tǒng)中的作用最初發(fā)現(xiàn)于大鼠外側(cè)（而不是背側(cè)）大腦新皮質(zhì)區(qū)域的顆粒層中表達(dá)Latexin的神經(jīng)元位于新皮層的受限部位，因此，Latexin[9]。進(jìn)一步的研究表明，Latexin在調(diào)節(jié)感覺知覺....

圖3.NF-B信號(hào)通路圖，引自文獻(xiàn)[41]

圖3.NF-B信號(hào)通路圖，引自文獻(xiàn)[41]在NF-B通路中的作用由76個(gè)氨基酸組成的小分子多肽，廣泛存在于細(xì)胞中。單獨(dú)的能，只是一種分子標(biāo)記蛋白，其發(fā)揮作用必須在ATP條件下，。蛋白質(zhì)泛素化是一種翻譯后修飾過(guò)程，將單個(gè)或多個(gè)泛素蛋素化是通過(guò)三個(gè)酶促步驟催化的....

圖4.泛素化介導(dǎo)的蛋白質(zhì)降解過(guò)程，引自文獻(xiàn)[46]

圖4.泛素化介導(dǎo)的蛋白質(zhì)降解過(guò)程，引自文獻(xiàn)[46]泛素連接酶E3在泛素化過(guò)程中具有重要作用。泛素連接酶E3根據(jù)特定的結(jié)分為兩類：（1）HECT結(jié)構(gòu)域家族；（2）RING結(jié)構(gòu)域家族。具有HECT結(jié)構(gòu)泛素連接酶E3是唯一可以和泛素形成硫酯鍵中間體[53,54]....

本文編號(hào)：3890852