滋養(yǎng)層細(xì)胞作為胎盤發(fā)育的前體細(xì)胞對于哺乳動物早期胚胎的著床是至關(guān)重要的。但是目前對調(diào)控滋養(yǎng)層細(xì)胞發(fā)育過程的分子調(diào)控機(jī)制還有待更加細(xì)致的研究。在本研究項目中,我們發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄共激活因子Cited1在誘導(dǎo)小鼠胚胎干細(xì)胞向滋養(yǎng)層分化過程中發(fā)揮了重要作用。敲除Cited1能夠抑制BMP誘導(dǎo)的胚胎干細(xì)胞向滋養(yǎng)層細(xì)胞分化的進(jìn)程。相反地,在胚胎干細(xì)胞中過表達(dá)Cited1后可以誘導(dǎo)滋養(yǎng)層相關(guān)基因的表達(dá)。體內(nèi)實驗表明,過表達(dá)Cited1的細(xì)胞可以在小鼠皮下形成典型的具有出血點的滋養(yǎng)層細(xì)胞瘤。轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析顯示過表達(dá)Cited1激活了類似滋養(yǎng)層細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄程序。在分子機(jī)制上,我們推測Cited1通過分別與Bmpr2和Smad4相互作用在細(xì)胞漿中激活Cited1-Bmpr2-Smad1/5/8軸及在細(xì)胞核中形成Cited1-Smad4-p300復(fù)合體從而激活BMP通路來行使其功能�？偟膩碚f,我們的研究結(jié)果表明,Cited1通過激活BMP信號通路誘導(dǎo)小鼠胚胎干細(xì)胞向滋養(yǎng)層方向分化。

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

圖3.TSCs分化示意圖

圖4.Fgf維持TSCs命運的轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)14

圖9利用CRISPR-Cas9系統(tǒng)構(gòu)建敲除Cited1的ESC細(xì)胞系A(chǔ).構(gòu)建敲除Cited1的ESC細(xì)胞系原理的示意圖；B.4個敲除Cited1的ESC細(xì)胞系基因組42

圖10敲除Cited1可以阻礙BMP4誘導(dǎo)ESCs分化成滋養(yǎng)層樣細(xì)胞A.BMP4處理敲除Cited16天后細(xì)胞形態(tài)變化圖，標(biāo)尺為200m；B.通過qRT-PCR檢測BMP4誘導(dǎo)敲除Cited1ESCs在分化成滋養(yǎng)層樣細(xì)胞的過程中全能性標(biāo)記基因的mRNA表達(dá)

本文編號：3889815