滋養(yǎng)層細胞作為胎盤發(fā)育的前體細胞對于哺乳動物早期胚胎的著床是至關重要的。但是目前對調(diào)控滋養(yǎng)層細胞發(fā)育過程的分子調(diào)控機制還有待更加細致的研究。在本研究項目中,我們發(fā)現(xiàn)轉錄共激活因子Cited1在誘導小鼠胚胎干細胞向滋養(yǎng)層分化過程中發(fā)揮了重要作用。敲除Cited1能夠抑制BMP誘導的胚胎干細胞向滋養(yǎng)層細胞分化的進程。相反地,在胚胎干細胞中過表達Cited1后可以誘導滋養(yǎng)層相關基因的表達。體內(nèi)實驗表明,過表達Cited1的細胞可以在小鼠皮下形成典型的具有出血點的滋養(yǎng)層細胞瘤。轉錄組學分析顯示過表達Cited1激活了類似滋養(yǎng)層細胞的轉錄程序。在分子機制上,我們推測Cited1通過分別與Bmpr2和Smad4相互作用在細胞漿中激活Cited1-Bmpr2-Smad1/5/8軸及在細胞核中形成Cited1-Smad4-p300復合體從而激活BMP通路來行使其功能�？偟膩碚f,我們的研究結果表明,Cited1通過激活BMP信號通路誘導小鼠胚胎干細胞向滋養(yǎng)層方向分化。

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【學位級別】：碩士

圖3.TSCs分化示意圖

圖4.Fgf維持TSCs命運的轉錄因子調(diào)控網(wǎng)絡14

圖9利用CRISPR-Cas9系統(tǒng)構建敲除Cited1的ESC細胞系A.構建敲除Cited1的ESC細胞系原理的示意圖；B.4個敲除Cited1的ESC細胞系基因組42

圖10敲除Cited1可以阻礙BMP4誘導ESCs分化成滋養(yǎng)層樣細胞A.BMP4處理敲除Cited16天后細胞形態(tài)變化圖，標尺為200m；B.通過qRT-PCR檢測BMP4誘導敲除Cited1ESCs在分化成滋養(yǎng)層樣細胞的過程中全能性標記基因的mRNA表達

本文編號：3889815