目的觀察低氧是否促進(jìn)人單核細(xì)胞炎癥因子的分泌,以及探討其是否通過PI3K/Akt和低氧誘導(dǎo)因子(HIF-1α)信號通路而發(fā)揮作用。方法 1體外低氧(1%O2)培養(yǎng)人源單核細(xì)胞系THP-1,24 h;2分別加入PI3K抑制劑(LY294002)和HIF-1α抑制劑(KC7F2)預(yù)處理THP-1細(xì)胞后再進(jìn)行低氧干預(yù);3在常氧下,分別加入Akt激動劑(胰島素)和HIF-1α激動劑(二甲氧乙二酰甘氨酸,DMOG)對THP-1細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)。Western blot檢測p-Akt和HIF-1α蛋白表達(dá)的水平,ELISA法檢測IL-1β和TNF-α分泌的變化。結(jié)果與對照組(常氧培養(yǎng))比較,低氧干預(yù)后THP-1細(xì)胞p-Akt、HIF-1α的蛋白表達(dá)增加,IL-1β、TNF-α分泌增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與低氧組(低氧培養(yǎng))比較,PI3K抑制劑預(yù)處理能顯著降低p-Akt、HIF-1α的蛋白表達(dá),HIF-1α抑制劑預(yù)處理能降低HIF-1α的蛋白表達(dá),但不影響p-Akt表達(dá)水平,兩種藥物預(yù)處理都能減少IL-1β和TNF-α分泌,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與對照組比較,Ak...

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)、干預(yù)和分組
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組
        1.2.3 細(xì)胞干預(yù)
    1.3 Western Blot檢測各組細(xì)胞p-Akt、Akt、HIF-1α蛋白表達(dá)
    1.4 ELISA測細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-1β和TNF-α表達(dá)水平
    1.5 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 低氧環(huán)境下抑制HIF-1α和PI3K/Akt對THP-1細(xì)胞炎癥相關(guān)通路和炎癥因子的影響
        2.1.1 低氧環(huán)境下KC7F2及LY294002對THP-1細(xì)胞p-Akt、HIF-1α蛋白表達(dá)水平的影響
        2.1.2 低氧環(huán)境下KC7F2及LY294002對THP-1細(xì)胞IL-1β和TNF-α分泌水平的影響
    2.2 上調(diào)Akt及HIF-1對THP-1細(xì)胞炎癥相關(guān)通路和炎癥因子的影響
        2.2.1 胰島素干預(yù)及DMOG干預(yù)對THP-1細(xì)胞p-Akt、HIF-1α蛋白表達(dá)水平的比較
        2.2.2 胰島素及DMOG干預(yù)對THP-1細(xì)胞IL-1β和TNF-α分泌水平的影響
3 討論



本文編號：3888732