發(fā)布時(shí)間：2017-05-23 11:15

  本文關(guān)鍵詞：hAMSC對(duì)小鼠卵巢上皮細(xì)胞向卵母細(xì)胞樣細(xì)胞分化的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:建立人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞(h AMSC)和小鼠卵巢上皮細(xì)胞(OSEC)共培養(yǎng)模型,初步探討h AMSC對(duì)小鼠OSEC向卵母細(xì)胞樣細(xì)胞分化的影響。方法:采用酶消化法和差速貼壁法分離、純化hAMSC和小鼠OSEC,流式細(xì)胞術(shù)和免疫細(xì)胞化學(xué)染色分別鑒定h AMSC和OSEC。應(yīng)用transwell板,建立h AMSC和小鼠OSEC共培養(yǎng)模型,觀察h AMSC對(duì)小鼠OSEC細(xì)胞形態(tài)變化,免疫組化、圖像分析與實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測上皮細(xì)胞、多能性和生殖細(xì)胞標(biāo)志物的m RNA和蛋白表達(dá)。結(jié)果:1 P4代h AMSC呈長梭形、漩渦狀貼壁生長,流式細(xì)胞術(shù)鑒定h AMSC高表達(dá)CD44、CD90、CD73、CD105,不表達(dá)或低表達(dá)CD45、CD34、CD19、CD11b和HLA-DR。2免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果顯示,傳至P2代的小鼠OSEC陽性表達(dá)廣譜角蛋白Pan-cytokeratin,提示小鼠OSEC為上皮細(xì)胞性來源。P3 OSEC與h AMSC共培養(yǎng)組與OSEC單獨(dú)培養(yǎng)組OSEC均表達(dá)上皮角蛋白Pan-cytokeratin陽性,并可表達(dá)生殖細(xì)胞特異性的標(biāo)志物Ddx4/MVH和多能性標(biāo)志蛋白Oct4,且共培養(yǎng)組小鼠OSEC Pan-cytokeratin、Ddx4/MVH、Oct4三種蛋白表達(dá)明顯高于單獨(dú)培養(yǎng)組(P0.05)。3 RT-PCR檢測結(jié)果顯示,共培養(yǎng)組小鼠OSEC生殖干細(xì)胞特征標(biāo)志性基因Gdf9、Nanog、Ddx4/MVH m RNA表達(dá)量顯著高于單獨(dú)培養(yǎng)組(P0.05),但兩組OSEC中均未到ZP基因m RNA的表達(dá)。結(jié)論:體外培養(yǎng)的小鼠OSEC表達(dá)上皮來源標(biāo)志Pan-cytokeratin及多能性標(biāo)志蛋白Oct4、Nanong和生殖細(xì)胞特征性標(biāo)志物Ddx4/MVH和Gdf9,表明OSEC可能是一種重要的卵巢干細(xì)胞來源;h AMSC與OSEC共培養(yǎng),可促進(jìn)OSEC向卵母細(xì)胞樣細(xì)胞分化。
【關(guān)鍵詞】：卵巢 生殖干細(xì)胞 卵巢上皮細(xì)胞 卵母細(xì)胞樣細(xì)胞 人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 中英文縮略詞表4-5
• 中文摘要5-6
• Abstract6-8
• 前言8-10
• 材料與方法10-18
• 結(jié)果18-25
• 討論25-28
• 結(jié)論28-29
• 參考文獻(xiàn)29-32
• 綜述32-42
• 參考文獻(xiàn)38-42
• 致謝42-43
• 作者簡介43

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 范靜;姜宏;殷慧群;汪存利;何瑞冰;;誘導(dǎo)骨髓SSEA-1~+干細(xì)胞向卵母細(xì)胞分化的初步研究[J];生殖與避孕;2015年08期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張鶴美;小鼠卵巢表面上皮細(xì)胞在自發(fā)惡性轉(zhuǎn)化過程中間質(zhì)性及干細(xì)胞樣特征改變[D];蘇州大學(xué);2014年

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本文編號(hào)：387781