作為全球流行率最高的慢性病毒性感染疾病,慢性乙型肝炎病毒感染(Chronic hepatitis B virus infectoin)尚缺乏有效治愈藥物。當(dāng)前主要的抗HBV藥物包括干擾素α(IFN-α)和核苷/核苷酸類似物(NAs),兩類藥物能有效抑制HBV病毒復(fù)制并部分控制疾病進(jìn)展,但僅能在極少部分患者(<5%)中實(shí)現(xiàn)臨床治愈(HBsAg陰轉(zhuǎn))。現(xiàn)有研究表明,慢性乙肝感染者體內(nèi)高水平的HBsAg可能是導(dǎo)致宿主免疫耐受的重要原因,新型Anti-HBV藥物的研究應(yīng)有效降低患者體內(nèi)HBsAg,助力于宿主Anti-HBV免疫應(yīng)答恢復(fù),從而有效實(shí)現(xiàn)HBsAg陰轉(zhuǎn)。本實(shí)驗(yàn)室團(tuán)隊(duì)在前期研究中發(fā)現(xiàn)了能在HBV小鼠模型中高效清除HBV的E6F6抗體,成功鑒定出了其識別表位HBsAgaa119-125,并將帶有該表位的多肽SEQ13(HBsAg-aa113-135)展示于類病毒顆粒載體上,構(gòu)建出了新型表位嵌合型治療性乙肝疫苗CR-T3-SEQ13。我們已經(jīng)在多種動物模型中證明該疫苗具有顯著的Anti-HBV治療效果、良好的免疫原性和安全性。但目前尚缺乏對于CR-T3-SEQ13候選疫苗分子在動物模...

【文章頁數(shù)】：94 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
Abbreviations
第一章 前言
    1 乙型肝炎病毒
        1.1 HBV基因組
        1.2 HBV病毒顆粒結(jié)構(gòu)
        1.3 HBV的生命周期
        1.4 HBV的流行病學(xué)
    2 乙型肝炎病毒的感染
        2.1 急性HBV感染
        2.2 慢性HBV感染
        2.3 HBV感染的致病機(jī)制
    3 乙型肝炎的動物研究模型
        3.1 HBV轉(zhuǎn)基因小鼠模型
        3.2 基于AAV載體的HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)小鼠模型
        3.3 pAAV-1.2HBV質(zhì)粒高壓注射小鼠模型
        3.4 人肝嵌合小鼠模型
    4 乙型肝炎的藥物治療
        4.1 核苷類似物
        4.2 α干擾素
        4.3 新型抗乙肝藥物
    5 本實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)思路、目的和意義
第二章 材料與方法
    1. 材料
        1.1 主要設(shè)備
        1.2 主要耗材
        1.3 質(zhì)粒、菌株、細(xì)胞株
        1.4 試劑
        1.5 實(shí)驗(yàn)動物
        1.6 常用溶液及培養(yǎng)基配制
    2. 方法
        2.1 分子克隆實(shí)驗(yàn)
        2.2 蛋白表達(dá)純化與鑒定
        2.3 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
        2.4 動物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
第三章 結(jié)果與分析
    1. 小鼠α干擾素(mIFN-α)的制備與活性分析
        1.1 小鼠α干擾素基因的調(diào)取
        1.2 小鼠α干擾素蛋白的純化與鑒定
        1.3 小鼠α干擾素蛋白的去內(nèi)毒素處理
        1.4 小鼠α干擾素蛋白的活性檢測
        1.5 小鼠α干擾素蛋白的體內(nèi)評估
        1.6 第一部分小結(jié)
    2. 乙肝治療性疫苗蛋白的制備與分析
        2.1 乙肝治療性疫苗蛋白的純化
        2.2 乙肝治療性疫苗蛋白的電鏡結(jié)構(gòu)
        2.3 乙肝治療性疫苗蛋白的去內(nèi)毒素處理
        2.4 第二部分小結(jié)
    3. 乙肝治療性疫苗免疫程序摸索實(shí)驗(yàn)
    4. 乙肝治療性疫苗與α干擾素蛋白聯(lián)用實(shí)驗(yàn)
        4.1 乙肝治療性疫苗與α干擾素在轉(zhuǎn)基因小鼠上的聯(lián)合治療
        4.2 乙肝治療性疫苗與α干擾素聯(lián)合治療程序摸索
        4.3 第四部分小結(jié)
    5. 乙肝治療性疫苗與核苷類似物聯(lián)合治療實(shí)驗(yàn)
    6. 乙肝治療性疫苗與129G1抗體聯(lián)合治療實(shí)驗(yàn)
    7. 乙肝治療性疫苗抗體表位分析
        7.1 乙肝治療性疫苗抗體篩選
        7.2 乙肝治療性疫苗抗體表位鑒定
        7.3 第七部分小結(jié)
第四章 討論
    1 乙肝治療性疫苗是具有潛力的治愈慢乙肝的藥物
    2 聯(lián)合治療是較優(yōu)的慢乙肝治療策略
    3 病毒樣顆粒載體是較優(yōu)的表位展示載體
    4 基于治療性疫苗的免疫增強(qiáng)策略優(yōu)化
第五章 小結(jié)與展望
    小結(jié)
    展望
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄



本文編號：3855555