目的： 為了探究NKT細(xì)胞對C57BL/6小鼠胚胎著床和發(fā)育的影響及其可能的免疫機(jī)制,通過刺激NKT細(xì)胞增殖活化,觀察胚胎著床及發(fā)育情況,同時(shí)檢測其分泌的細(xì)胞因子IL-10和TNF-α變化,以分析其在母體子宮內(nèi)膜免疫微環(huán)境中的調(diào)節(jié)作用。 方法： 1、在小鼠胚胎著床前后的不同時(shí)間腹腔注射不同濃度的抗原KRN7000刺激NKT細(xì)胞活化,整體觀察胚胎著床和發(fā)育情況。 2、在小鼠胚胎著床前后的不同時(shí)間腹腔注射不同濃度的抗原KRN7000刺激NKT細(xì)胞活化,用RT-PCR法半定量檢測NKT細(xì)胞活化后子宮蛻膜組織中IL-10和TNF-αmRNA的表達(dá)量。 結(jié)果： 1、分別給妊娠D3(著床前一天)和妊娠D6(著床后)小鼠腹腔注射不同濃度(0,1.25,2.5,5μg/ml)的抗原KRN7000每只0.4m1,于妊娠D8觀察著床胚胎數(shù)及其發(fā)育情況,結(jié)果顯示于妊娠D3給藥后,各實(shí)驗(yàn)組胚胎著床數(shù)減少,與對照組相比存在顯著差異(P<0.05),著床后的胚胎發(fā)育不良,但不同實(shí)驗(yàn)組之間不存在顯著差異(P>0.05)。于妊娠D6給藥后,各實(shí)驗(yàn)組均誘導(dǎo)胚胎流產(chǎn),胚胎吸收率均達(dá)100%。 2、分別給妊娠D...

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 引言
第2章 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 試劑
            2.1.2.1 試劑
            2.1.2.2 引物合成
        2.1.3 主要儀器
    2.2 方法
        2.2.1 動(dòng)物模型的制備
        2.2.2 KRN7000對小鼠胚胎著床和發(fā)育的影響
        2.2.3 RT-PCR檢測子宮蛻膜中TNF-α和IL-10 mRNA的表達(dá)
            2.2.3.1 實(shí)驗(yàn)分組
            2.2.3.2 提取小鼠子宮蛻膜中總RNA
            2.2.3.3 RNA逆轉(zhuǎn)錄
            2.2.3.4 PCR擴(kuò)增
            2.2.3.5 瓊脂糖凝膠電泳及分析
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第3章 結(jié)果
    3.1 KRN7000對小鼠胚胎著床和發(fā)育的影響
        3.1.1 妊娠D3給藥后小鼠的著床胚胎數(shù)及胚胎發(fā)育情況
        3.1.2 KRN7000對早孕小鼠胚胎的影響
    3.2 KRN7000對妊娠D4子宮蛻膜中IL-10和TNF-αmRNA表達(dá)的影響
        3.2.1 KRN7000對妊娠D4子宮蛻膜組織中IL-10 mRNA表達(dá)的影響
        3.2.2 KRN7000對妊娠D4子宮蛻膜組織中TNF-α mRNA表達(dá)的影響
    3.3 KRN7000對妊娠D7子宮蛻膜中IL-10和TNF-α mRNA表達(dá)的影響
        3.3.1 KRN7000對妊娠D7子宮蛻膜組織中IL-10的mRNA表達(dá)的影響
        3.3.2 KRN7000對妊娠D7子宮蛻膜組織中TNF-α的mRNA表達(dá)的影響
    3.4 NKT細(xì)胞活化后TNF-α/IL-10比值的變化
        3.4.1 不同濃度抗原激活NKT細(xì)胞后,妊娠D4 TNF-α/IL-10的變化
        3.4.2 不同濃度抗原激活NKT細(xì)胞后,妊娠D7 TNF-α/IL-10的變化
第4章 討論
    4.1 NKT細(xì)胞對胚胎著床的意義
    4.2 NKT細(xì)胞對著床前后子宮蛻膜中IL-10和TNF-α分泌的影響
    4.3 NKT細(xì)胞對小鼠子宮蛻膜中TH1/TH2平衡的影響
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間研究成果
綜述 細(xì)胞因子對胚胎著床影響的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3854985