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NF-κB乙酰化介導(dǎo)低氧條件下DDAH1基因的表達調(diào)控

發(fā)布時間:2023-10-16 20:39
  前言:心腦血管疾病(Cardio-cerebrovascular disease,CCVD)是一類由遺傳和環(huán)境共同作用導(dǎo)致的多因素疾病,已成為全球較常見的死因。血管的病理學(xué)改變?nèi)缪鼙谘某练e、慢性的炎癥反應(yīng)和血管平滑肌的增生等,會導(dǎo)致局部組織的缺血缺氧。有研究發(fā)現(xiàn)缺氧可以導(dǎo)致舒血管因子一氧化氮(NO)產(chǎn)生量的增加。NO是調(diào)節(jié)血管舒縮功能的主要調(diào)節(jié)劑,在血管內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中起關(guān)鍵作用,它由一氧化氮合酶(NOS)酶產(chǎn)生。非對稱性二甲基精氨酸(Asymmetric dimethylarginine,ADMA)是一種內(nèi)源性NOS抑制劑,是心血管死亡率和慢性腎臟疾病進展的危險因素。循環(huán)中的ADMA主要由二甲基精氨酸二甲胺水解酶(Dimethylarginine dimethylaminohydrolase,DDAH)降解。DDAH有兩種亞型,包括DDAH1和DDAH2,研究顯示DDAH1是降解ADMA的關(guān)鍵酶,并有研究表明DDAH1啟動子區(qū)存在著幾個脂類代謝和炎癥相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子作用位點。NF-κB是一種參與介導(dǎo)細胞炎癥反應(yīng)的核轉(zhuǎn)錄因子,缺氧會在不同程度上引起細胞組織的炎癥反應(yīng),同時低氧條件下NF...

【文章頁數(shù)】:64 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料和方法
    2.1 細胞系
    2.2 主要試劑和儀器
        2.2.1 主要試劑
        2.2.2 主要儀器
    2.3 生物信息學(xué)網(wǎng)址和計算機分析軟件
    2.4 實驗方法
        2.4.1 細胞培養(yǎng)
        2.4.2 細胞總RNA的提取
        2.4.3 cDNA合成和Real-timePCR反應(yīng)
        2.4.4 WesternBlot
        2.4.5 熒光素酶表達載體的構(gòu)建
        2.4.6 熒光素酶報告基因活性檢測
        2.4.7 ChIP
        2.4.8 DNA結(jié)合實驗及WesternBlot
        2.4.9 IP結(jié)合WesternBlot
        2.4.10 統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果
    3.1 低氧對DDAH1表達水平的影響
    3.2 DDAH1啟動子區(qū)NF-κB反應(yīng)元件的預(yù)測與鑒定
        3.2.1 DDAH1啟動子區(qū)NF-ΚB反應(yīng)元件的預(yù)測與熒光素酶表達載體的構(gòu)建
        3.2.2 CHIP實驗體內(nèi)鑒定NF-κB與DDAH1啟動子區(qū)NF-κB反應(yīng)元件結(jié)
        3.2.3 DNA結(jié)合實驗及westernBlot實驗體外鑒定NF-κB與DDAH1啟動子區(qū)NF-κB反應(yīng)元件結(jié)合
    3.3 低氧處理對NF-κB乙酰化水平的影響
    3.4 乙;瘜DAH1表達的影響
    3.5 低氧處理及乙酰化對DDAH1表達的影響
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號:3854612

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