目的:探討核因子кB(Nuclear Factor-кB,NF-кB)信號通路是否參與調(diào)節(jié)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)的增殖及凋亡作用。 材料和方法:(1)貼壁法獲取骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞:取股骨頭置換或全髖關(guān)節(jié)置換患者股骨髓腔內(nèi)骨髓血混合物,通過差速貼壁法分離培養(yǎng)純化鑒定骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察。(2)流式細(xì)胞術(shù)鑒定表面分子表達(dá):采用細(xì)胞表面分子標(biāo)志流式抗體熒光染色后,用流式細(xì)胞方法檢測細(xì)胞表面分子表達(dá)。(3)應(yīng)用蛋白凝膠電泳(western blotting)的方法檢測藥物干預(yù)(激活劑脂多糖,Lipopolysaccharides,LPS;抑制劑吡咯烷二硫代氨基甲酸鹽,PDTC)后NF-кB表達(dá)水平以及增殖、凋亡相關(guān)蛋白變化。(4)另用蛋白凝膠電泳分別檢測相關(guān)蛋白如PARP、PCNA等蛋白表達(dá)的變化。(5)細(xì)胞增殖檢測:用MTT比色方法檢測骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在LPS及PDTC的作用下其增殖的變化。(6)細(xì)胞凋亡檢測:通過將細(xì)胞標(biāo)記PI后進(jìn)行流式細(xì)胞分析檢測在NF-кB信號通路激活后細(xì)胞凋亡變化。 結(jié)果:(1)從手術(shù)中人股...

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
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英文摘要
引言
第一部分 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)純化鑒定
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料與主要試劑及儀器
    1.2 主要實(shí)驗(yàn)方法
    1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1.4 討論
    1.5 小結(jié)
第二部分 NF－кB 參與間充質(zhì)干細(xì)胞增殖調(diào)節(jié)
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與主要試劑及儀器
    2.2 主要實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3853462