目的建立一種更穩(wěn)定、可重復(fù)的小鼠皮瓣缺血再灌注損傷(IRI)模型,明確皮瓣缺血再灌注損傷機(jī)制,闡述皮瓣缺血時(shí)間、再灌注血流量與皮瓣損傷程度的關(guān)系。方法共選用162只SPF級(jí)ICR健康雄性小鼠為本次實(shí)驗(yàn)對(duì)象。(1)實(shí)驗(yàn)一,選用90只ICR小鼠,采用抽簽法隨機(jī)分為3組(n=30):胸部皮瓣組、背部皮瓣組、腹部皮瓣組,再分別將各組小鼠按夾閉皮瓣蒂血管的時(shí)間(皮瓣缺血時(shí)間)分為6個(gè)亞組(n=5):Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ、Ⅴ、Ⅵ組,對(duì)應(yīng)的缺血時(shí)間分別為0、1.5、3.0、5.0、8.0、10.0 h。胸部、背部、腹部皮瓣分別以左側(cè)胸外側(cè)動(dòng)脈、胸背動(dòng)脈、腹淺動(dòng)脈為對(duì)稱軸設(shè)計(jì)寬1.5 cm、長(zhǎng)3.0 cm的軸型皮瓣。微型動(dòng)脈夾夾閉血管蒂,建立缺血皮瓣模型。用全景激光灌注成像儀(FLPI)觀察各組皮瓣基礎(chǔ)血流量,再灌注7 d后觀察皮瓣存活情況,計(jì)算壞死率,確定最佳小鼠皮瓣IRI模型。(2)實(shí)驗(yàn)二,選用另外72只ICR小鼠,建立上述胸部皮瓣IRI模型,按皮瓣缺血時(shí)間分為6組(n=12):ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ、ⅴ、ⅵ組,對(duì)應(yīng)的缺血時(shí)間分別為0、1.5、3.0、5.0、8.0、10.0 h,用FLPI動(dòng)態(tài)觀察各組皮瓣的血...

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和主要試劑、儀器來源
        1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:
        2.主要儀器、儀器:
    二、實(shí)驗(yàn)一——小鼠不同皮瓣IRI模型的比較
        (一)動(dòng)物分組
        (二)小鼠不同皮瓣IRI模型制備
            1.小鼠胸部皮瓣模型:
            2.背部皮瓣模型:
            3.腹部皮瓣模型:
        (三)FLPI測(cè)量皮瓣血流灌注量
        (四)皮瓣壞死率
    三、實(shí)驗(yàn)二——缺血再灌注對(duì)皮瓣影響機(jī)制的研究
        (一)動(dòng)物分組
        (二)FLPI測(cè)量胸部皮瓣缺血再灌注過程血流灌注量變化
        (三)皮瓣壞死率
        (四)組織學(xué)分析
        (五)二氯氫化熒光素二乙酸酯細(xì)胞內(nèi)活性氧檢測(cè)探針法檢測(cè)皮瓣細(xì)胞內(nèi)活性氧含量
            1.單細(xì)胞懸液制備:
            2.熒光探針標(biāo)記:
            3.熒光檢測(cè):
        (六)TUNEL技術(shù)檢測(cè)凋亡細(xì)胞
        (七)ELISA檢測(cè)再灌注24.0 h后皮瓣組織內(nèi)TNF- α表達(dá)水平
    四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
    一、實(shí)驗(yàn)一——小鼠不同皮瓣IRI模型的比較
        (一)不同部位皮瓣基礎(chǔ)血流灌注量比較
        (二)缺血時(shí)間對(duì)不同部位皮瓣壞死率的影響
            1.胸部皮瓣:
            2.背部皮瓣:
            3.腹部皮瓣:
    二、實(shí)驗(yàn)二——缺血再灌注對(duì)皮瓣影響機(jī)制的研究
        (一)缺血時(shí)間對(duì)皮瓣再灌注血流量的影響
        (二)缺血時(shí)間對(duì)胸部皮瓣壞死率的影響
        (三)缺血時(shí)間對(duì)皮瓣組織學(xué)的影響
        (四)缺血時(shí)間對(duì)胸部皮瓣組織細(xì)胞內(nèi)活性氧含量的影響
        (五)缺血時(shí)間對(duì)皮瓣細(xì)胞凋亡的影響
        (六)缺血時(shí)間對(duì)皮瓣組織內(nèi)TNF-α表達(dá)水平的影響
討 論



本文編號(hào)：3853191