目的:研究人腸道來源艱難梭感染Caco-2細(xì)胞對NF-κB信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。方法:用艱難梭菌毒素A和毒素B感染Caco-2細(xì)胞24 h,以未感染艱難梭菌毒素A和毒素B的Caco-2細(xì)胞為對照組,蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測真核細(xì)胞核因子(NF-κB)通路蛋白P-p65和p65的表達(dá); Caco-2細(xì)胞用6孔板制作爬片,待細(xì)胞長滿6孔板后,以感染復(fù)數(shù)(MOI)=100加入艱難梭菌,與Caco-2細(xì)胞共培養(yǎng)3、6、9、12及24 h,革蘭染色后油鏡觀察,記錄黏附細(xì)菌數(shù)與細(xì)胞數(shù),計算共培養(yǎng)時間與細(xì)菌黏附數(shù)量之間的關(guān)系;艱難梭菌感染Caco-2細(xì)胞12 h,以Caco-2為對照組,蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測NF-κB通路蛋白P-p65、p65、IKKα及IκBα的表達(dá)。結(jié)果:艱難梭菌與Caco-2細(xì)胞共培養(yǎng)12 h時黏附數(shù)最多,P-p65和IKKα蛋白表達(dá)增加(P<0.05),p65和IκBα蛋白表達(dá)降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論:人源艱難梭菌感染Caco-2細(xì)胞可激活NF-κB信號通路。

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑與儀器
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)菌培養(yǎng)
        1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.3 顯微鏡觀察艱難梭菌與細(xì)胞黏附
        1.2.4 Western blot 實(shí)驗(yàn)
2 結(jié)果
    2.1 艱難梭菌與Caco-2黏附
    2.2 毒素A和B感染Caco-2細(xì)胞后NF-κB信號通路p65蛋白表達(dá)
    2.3 艱難梭菌感染Caco-2細(xì)胞后NF-κB通路P-p65、p65總蛋白、IKKα及IκBα 蛋白表達(dá)
3 討論



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