內(nèi)臟脂肪素,簡稱內(nèi)脂素(Visfatin),是近年來新發(fā)現(xiàn)的一種參與機體炎癥和免疫應(yīng)答反應(yīng)的脂肪細胞因子,它的發(fā)現(xiàn)推動了脂肪組織和炎癥之間關(guān)系的研究,而炎癥又可以引起細胞凋亡和自噬,所以內(nèi)脂素可能直接或間接影響細胞凋亡和自噬反應(yīng)。急性肺損傷(ALI)是全身炎癥反應(yīng)綜合征表現(xiàn)在肺部的呼吸系統(tǒng)性疾病,經(jīng)常被用作一種炎癥模型。研究發(fā)現(xiàn),在急性肺損傷動物模型中,肺泡灌洗液的內(nèi)脂素水平升高,推測內(nèi)脂素作為炎性介質(zhì)可能參與肺部炎癥的發(fā)生和發(fā)展,從而影響細胞凋亡和自噬。因此,本試驗以昆明小鼠為研究對象,利用LPS構(gòu)建的急性肺損傷模型,通過HE染色、TUNEL、透射電鏡、免疫組織化學(xué)染色、實時熒光定量PCR和Western blot等技術(shù)方法研究內(nèi)脂素對急性肺損傷肺部細胞凋亡、自噬及PI3K/AKT信號通路的作用,以探討內(nèi)脂素是否通過PI3K/AKT信號通路調(diào)節(jié)凋亡和自噬參與炎癥反應(yīng),闡明內(nèi)脂素在LPS介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)中與肺內(nèi)細胞凋亡和自噬之間的關(guān)系及作用機制。研究結(jié)果如下:1.內(nèi)脂素對急性肺損傷肺組織結(jié)構(gòu)的影響利用LPS誘導(dǎo)構(gòu)建的急性肺損傷模型,取肺組織制作石蠟切片并進行HE染色。顯微鏡下觀察:生理鹽...

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語表
1 前言
    1.1 立題背景
    1.2 文獻綜述
        1.2.1 內(nèi)脂素的研究進展
        1.2.2 急性肺損傷的研究進展
        1.2.3 內(nèi)脂素與急性肺損傷的關(guān)系
        1.2.4 細胞凋亡與自噬之間的關(guān)系
        1.2.5 PI3K/AKT信號通路的研究進展
    1.3 研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 試驗材料
        2.1.1 試驗動物及處理
        2.1.2 主要儀器與試劑
        2.1.3 主要溶液和試劑的配制
    2.2 試驗方法
        2.2.1 樣品采集和處理
        2.2.2 石蠟切片的制作
        2.2.3 HE染色
        2.2.4 透射電鏡
        2.2.5 細胞凋亡檢測技術(shù)(TUNEL法)
        2.2.6 免疫組化
        2.2.7 熒光定量q-PCR
        2.2.8 Western Blot
3 結(jié)果
    3.1 不同試驗組肺組織結(jié)構(gòu)的變化
        3.1.1 肺組織病理學(xué)變化
        3.1.2 小鼠肺組織內(nèi)血管內(nèi)皮生長因子的表達
    3.2 內(nèi)脂素對急性肺損傷肺組織細胞凋亡的影響
        3.2.1 凋亡細胞的檢測
        3.2.2 不同試驗組凋亡因子的mRNA表達
        3.2.3 不同試驗組凋亡相關(guān)因子的蛋白表達
    3.3 內(nèi)脂素對急性肺損傷肺組織細胞自噬的影響
        3.3.1 透射電鏡檢測自噬小體
        3.3.2 不同試驗組自噬因子的定位表達
        3.3.3 不同試驗組自噬因子的mRNA表達
        3.3.4 不同試驗組自噬因子蛋白的表達
    3.4 內(nèi)脂素對急性肺損傷PI3K/AKT信號通路相關(guān)基因的影響
4 討論
    4.1 內(nèi)脂素對急性肺損傷肺組織結(jié)構(gòu)的影響
    4.2 內(nèi)脂素對急性肺損傷肺組織細胞凋亡的影響
    4.3 內(nèi)脂素對急性肺損傷肺組織細胞自噬的影響
    4.4 急性肺損傷肺中內(nèi)脂素、細胞自噬和凋亡之間的關(guān)系
    4.5 內(nèi)脂素對PI3K/AKT信號通路的影響
5 結(jié)論
參考文獻
致謝
附錄1 個人簡介
附錄2 論文發(fā)表情況



本文編號：3846796