目的分析流行我國優(yōu)勢基因Chinese 1弓形蟲株WH3株和Wh6株,相關(guān)毒力因子ROP5和ROP18的蛋白序列差異,為研究其致病機制奠定基礎(chǔ)。方法分別復蘇將本室保存的WH3株和RH株弓形蟲蟲株,接種4-6w齡昆明小鼠,待其急性發(fā)病后,收集腹水并分別純化WH3株和RH株速殖子;分別從本室飼養(yǎng)的保種昆明小鼠腦內(nèi)分離出Wh6株和PRU株弓形蟲包囊,接種4-6w齡昆明小鼠,待其急性發(fā)病后,收集腹水并分別純化WH6株和PRU株速殖子。上述4個蟲株1×10³個速殖子分別感染40只SPF級BALB/c小鼠和40只昆明小鼠,觀察其存活時間和存活率,分析毒力強弱。提取上述4株弓形蟲的總RNA,反轉(zhuǎn)錄成cDNA,以此為模板,PCR擴增出弓形蟲棒狀體蛋白家族的毒力相關(guān)效應分子ROP5和ROP18的全長;將PCR擴增出產(chǎn)物測序,測序結(jié)果由核苷酸序列轉(zhuǎn)換為氨基酸序列,分析比較其蛋白水平的遺傳序列差異。結(jié)果本室保種4株弓形蟲株中,Chinese 1基因型WH3株和I型蟲株RH株對BALB/c小鼠和昆明小鼠均有較強的毒性,BALB/c小鼠在感染W(wǎng)H3株和RH株后5-7 d均100%死亡,而昆...

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
1 前言
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 蟲株
        2.1.3 擴增引物
        2.1.4 試劑及來源
        2.1.5 部分試劑的配置
        2.1.6 實驗所用儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 弓形蟲Wh3株和RH株的速殖子的獲取與純化
        2.2.2 弓形蟲Wh6株和PRU株的速殖子的獲取與純化
        2.2.3 四株T.gondii的毒力檢測
        2.2.4 各蟲株總RNA提取
        2.2.5 弓形蟲株cDNA的合成
        2.2.6 毒力相關(guān)基因ROP5和ROP18擴增
    2.3 統(tǒng)計學處理
3 結(jié)果
    3.1 四個T.gondii蟲株毒力
    3.2 毒力相關(guān)基因擴增結(jié)果
    3.3 毒力相關(guān)基因比對結(jié)果分析
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻
附錄一 個人簡歷
附錄二 致謝
附錄三 綜述
    參考文獻



本文編號：3832484