朊病毒病又稱可傳播性海綿狀腦病(TSE),是一類罕見的致死性神經(jīng)退行性疾病。在人類中主要包括克-雅病(Creutzfeldt-Jakob disease,CJD)、庫魯病(Kuru)、致死性家族型失眠癥(Fatal familial insomnia,FFI)、吉斯特曼斯特勞斯綜合癥(Gerstmann-Straussler-Scheinker,GSS)等,在動(dòng)物中主要包括牛的海綿狀腦病(Bovine spongiform encephalopathies,BSE)和羊瘙癢病(Scrapie)等。朊病毒病的臨床表現(xiàn)為進(jìn)行性共濟(jì)失調(diào)、震顫、認(rèn)知障礙,最終導(dǎo)致死亡,其病理特征為中樞神經(jīng)系統(tǒng)出現(xiàn)海綿狀變性、淀粉樣斑塊、神經(jīng)元丟失以及星形膠質(zhì)細(xì)胞增生等。目前該病較普遍認(rèn)同的機(jī)制為正常構(gòu)象的朊蛋白(PrP^C)錯(cuò)誤折疊,轉(zhuǎn)變?yōu)楫惓ｋ玫鞍?PrP^Sc),產(chǎn)生神經(jīng)毒性,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中積累并最終導(dǎo)致神經(jīng)元細(xì)胞死亡。堤岸田鼠對(duì)很多種屬的朊病毒易感。我們比較發(fā)現(xiàn)在堤岸田鼠的朊蛋白氨基酸序列中,只有兩個(gè)位點(diǎn)是同倉鼠和小鼠都不相同的,分別是位于C端的227和230位...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 研究背景
        1.1.1 朊病毒
        1.1.2 朊蛋白的結(jié)構(gòu)
        1.1.3 朊病毒病
        1.1.4 朊病毒毒株
        1.1.5 種屬屏障
        1.1.6 朊病毒的傳播
        1.1.7 朊病毒致病分子機(jī)制
        1.1.8 人朊病毒病的診斷和檢測(cè)
        1.1.9 PMCA和RT-QuIC
    1.2 研究目的、內(nèi)容、意義
第二章 實(shí)驗(yàn)材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 引物序列
        2.1.2 材料與試劑盒
        2.1.3 酶和抗體
        2.1.4 溶液、緩沖液
        2.1.5 朊病毒毒株
        2.1.6 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 腦組織勻漿的制備
        2.2.2 蛋白免疫印跡
        2.2.3 考馬斯亮藍(lán)染色
        2.2.4 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化
        2.2.5 構(gòu)建蛋白表達(dá)質(zhì)粒
        2.2.6 蛋白表達(dá)純化
        2.2.7 BCA蛋白濃度測(cè)定
        2.2.8 RT-QuIC反應(yīng)
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 Vole野生型及其兩種突變體蛋白表達(dá)
    3.2 Vole野生型及其兩種突變體具有更高的RT-QuIC反應(yīng)效率
    3.3 四種重組蛋白R(shí)T-QuIC反應(yīng)效率比較
    3.4 改變毒株后4種重組蛋白R(shí)T-QuIC反應(yīng)效率比較
    3.5 Vole野生型及其兩種突變體蛋白等電點(diǎn)和疏水能力分析
    3.6 Vole-WT和Ha-WT3D圖像
第四章 討論
第五章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表論文



本文編號(hào)：3773890