發(fā)布時(shí)間：2023-02-20 17:32

　　棘突(spike, S)蛋白是冠狀病毒表面必不可少的跨膜糖蛋白,在病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞時(shí)具有結(jié)合受體和誘導(dǎo)膜融合的雙重作用。大部分冠狀病毒S蛋白的受體結(jié)合域位于S1-CTD(即相對(duì)應(yīng)的結(jié)構(gòu)域B),而經(jīng)典的乙型冠狀病毒模型鼠肝炎病毒(mouse hepatitis virus, MHV)的受體mCEACAM1a與S1-NTD(即相對(duì)應(yīng)的結(jié)構(gòu)域A)結(jié)合,其結(jié)構(gòu)域B的作用仍未完全清楚。本研究通過構(gòu)建結(jié)構(gòu)域B和S2膜融合元件的缺失突變體,并使其在鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系Neuro-2a內(nèi)成功表達(dá),證實(shí)了結(jié)構(gòu)域B對(duì)病毒S蛋白導(dǎo)致的細(xì)胞-細(xì)胞間膜融合是必需的。用不同方法處理的病毒顆粒作為抗原免疫小鼠,所獲得的多克隆抗體進(jìn)一步顯示,結(jié)構(gòu)域B不但是S蛋白的主要抗原決定簇,而且能誘導(dǎo)中和抗體明顯抑制病毒感染和S蛋白介導(dǎo)的膜融合作用。此結(jié)果為闡述不同冠狀病毒的致病性與感染性差異提供了新思路。

【文章頁數(shù)】：9 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞和病毒
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)與病毒感染
    1.3 質(zhì)粒構(gòu)建與細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    1.4 病毒顆粒純化與滅活
    1.5 小鼠抗體制備
    1.6 蛋白印跡試驗(yàn)
    1.7 病毒中和實(shí)驗(yàn)
    1.8 病毒噬斑實(shí)驗(yàn)
2 結(jié)果
    2.1 結(jié)構(gòu)域B缺失使鼠冠狀病毒S蛋白不能誘導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞間膜融合
    2.2 不同滅活處理的鼠冠狀病毒均誘導(dǎo)產(chǎn)生識(shí)別S蛋白結(jié)構(gòu)域B的抗體
    2.3 結(jié)構(gòu)域B為鼠冠狀病毒S蛋白的優(yōu)勢(shì)抗原決定簇
    2.4 抗體對(duì)鼠冠狀病毒復(fù)制的抑制和S蛋白誘導(dǎo)的細(xì)胞-細(xì)胞間膜融合
3 討論



本文編號(hào)：3747011