目的：研究鞘氨醇激酶1/1-磷酸鞘氨醇(sphingosine kinases 1/ sphingosine-1-phospate, SPHKI/S1P)信號(hào)及沉默信息調(diào)節(jié)因子2相關(guān)酶類1(Silent mating type information regulation 2 homolog-1, SIRT1)對(duì)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cell, HUVEC)細(xì)胞功能的影響并探討SPHK1與SIRT1的相互關(guān)系及其作用機(jī)制。方法：利用酶切、回收、連接等方法構(gòu)建同時(shí)攜帶有SPHK1干涉序列與綠色熒光蛋白的慢病毒載體；CCK8檢測(cè)細(xì)胞的增殖能力；Transwell小室檢測(cè)細(xì)胞的遷移能力；流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期及細(xì)胞的凋亡情況；Matrigel膠檢測(cè)細(xì)胞的管狀結(jié)構(gòu)形成能力；實(shí)時(shí)定量PCR (Real-time PCR, RT-PCR)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)SPHK1及SIRT1的基因表達(dá)水平；Western Blot檢測(cè)細(xì)胞SPHK1、SIRT1的蛋白表達(dá)水平及ERK、AKT、P38 MAPK及NF-KappaB的磷酸化水平。結(jié)果：成功構(gòu)建了同時(shí)...

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略詞表
前言
第一部分 pLKO.l-shSPHKl-GFP重組質(zhì)粒的構(gòu)建
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
第二部分 SPHK1/S1P與SIRT1相互關(guān)系的研究及其對(duì)HUVEC生物學(xué)特性的影響
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
第三部分 SPHK1調(diào)控SIRT1表達(dá)從而影響HUVEC細(xì)胞遷移能力的機(jī)制研究
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
結(jié)論與討論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝



本文編號(hào)：3741155