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miR-20a-5p通過靶向Klf3調(diào)控小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化的研究

發(fā)布時(shí)間:2022-12-11 09:26
  目的:MicroRNA(miRNA)是一類長約19~22個(gè)核苷酸的內(nèi)源性單鏈非編碼RNA,廣泛存在于動(dòng)植物和病毒中,通過與靶基因m RNA完全或非完全堿基互補(bǔ)配對(duì)在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因的表達(dá)。miRNA廣泛參與調(diào)控機(jī)體的發(fā)育和各種內(nèi)穩(wěn)態(tài)事件。大量研究表明miRNA可以通過調(diào)控與成脂分化相關(guān)的許多轉(zhuǎn)錄因子來影響骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成脂分化。在本室的前期研究中我們已經(jīng)證實(shí)miR-20a-5p可以通過靶向賴氨酸特異性去甲基化酶6b(lysine-specific demethylase 6b,Kdm6b)和轉(zhuǎn)化生長因子-β受體II(transforming growth factor beta receptor II,Tgfbr2)促進(jìn)ST2骨髓基質(zhì)細(xì)胞系及C3H10T1/2間充質(zhì)干細(xì)胞系的成脂分化。然而,其在調(diào)控小鼠原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow derived stromal cells,BMSCs)成脂分化中的作用和分子機(jī)制尚不完全清楚。本研究將探討miR-20a-5p對(duì)小鼠原代BMSCs成脂分化的影響,并進(jìn)一步闡明其發(fā)揮作用的分子機(jī)制。方法:1、分離并培養(yǎng)小鼠原代BMSCs... 

【文章頁數(shù)】:104 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、miR-20a-5p對(duì)小鼠BMSCs成脂分化的影響
    1.1 對(duì)象和方法
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 小鼠原代BMSCs的培養(yǎng)和誘導(dǎo)成脂分化
        1.2.2 小鼠BMSCs誘導(dǎo)成脂分化過程中miR-20a-5p及成脂標(biāo)志基因的表達(dá)變化
        1.2.3 miR-20a-5p過表達(dá)和sponge慢病毒的包裝
        1.2.4 miR-20a-5p過表達(dá)對(duì)小鼠BMSCs成脂分化的影響
        1.2.5 miR-20a-5p的敲減對(duì)小鼠BMSCs成脂分化的影響
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、miR-20a-5p調(diào)控小鼠BMSCs成脂分化的機(jī)制研究
    2.1 對(duì)象和方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 miR-20a-5p靶基因的預(yù)測
        2.2.2 miR-20a-5p候選靶基因的鑒定
        2.2.3 miR-20a-5p對(duì)Klf5、Klf7基因表達(dá)的影響
        2.2.4 Klf3沉默表達(dá)對(duì)小鼠BMSCs成脂分化的影響
        2.2.5 拯救實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 同時(shí)過表達(dá)Klf3、Kdm6b和Tgfbr2對(duì)miR-20a-5p調(diào)控小鼠BMSCs成脂分化的影響
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 microRNA調(diào)控間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化的研究進(jìn)展
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]PPARγ在脂肪生成中的遺傳和表觀遺傳調(diào)控[J]. 崔婷婷,邢天宇,褚衍凱,李輝,王寧.  遺傳. 2017(11)



本文編號(hào):3718534

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