目的采用反轉(zhuǎn)錄重組酶介導(dǎo)核酸擴(kuò)增（RT-RAA）方法建立塔希納病毒（TAHV）檢測(cè)方法。方法在TAHV S節(jié)段保守區(qū)設(shè)計(jì)引物和探針。用構(gòu)建含檢測(cè)目的基因片段的質(zhì)粒和病毒細(xì)胞培養(yǎng)物對(duì)TAHV的RT-RAA檢測(cè)方法的靈敏性進(jìn)行評(píng)價(jià),通過(guò)檢測(cè)黃病毒屬、甲病毒屬、正布尼亞病毒屬和東南亞十二節(jié)段病毒屬共7種病毒驗(yàn)證方法的特異性。并選用2018年采集自寧夏回族自治區(qū)的30批次蚊蟲(chóng)樣本來(lái)評(píng)價(jià)該檢測(cè)方法。結(jié)果該方法對(duì)構(gòu)建的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的檢測(cè)下線(xiàn)為100拷貝/反應(yīng),病毒培養(yǎng)物最低檢出限為10空斑形成單位/反應(yīng),與其他7種蟲(chóng)媒病毒無(wú)交叉反應(yīng)。在檢測(cè)蚊蟲(chóng)樣本時(shí),該方法與實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)結(jié)果的一致性為100%。結(jié)論建立了快速、特異以及靈敏的TAHV的RT-RAA檢測(cè)方法,并適用于標(biāo)本中TAHV核酸的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。 

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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