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精子優(yōu)選新方法建立及相關(guān)調(diào)節(jié)機制研究

發(fā)布時間:2022-10-04 21:59
  目的建立一種人精子優(yōu)選方法并研究相關(guān)調(diào)節(jié)機制。方法設(shè)計制作一種新裝置,利用孕酮進行條件優(yōu)化,通過精子濃度檢測驗證方法可行性,同時檢測精子優(yōu)選前后的形態(tài)、DNA片段和凋亡狀態(tài)以評價優(yōu)選效果;進一步用特異性抑制劑格爾德霉素和(或)17-AAG研究了與孕酮作用相關(guān)的熱休克蛋白90(Hsp90)調(diào)節(jié)精子功能相關(guān)分子機制。結(jié)果確立了優(yōu)選人精子方法的實驗條件,經(jīng)所建立方法優(yōu)選后,形態(tài)正常和DNA完整的人精子比例增加,凋亡狀態(tài)沒有顯著變化。格爾德霉素抑制孕酮誘發(fā)的人精子獲能、活力及超激活運動。Hsp90與共伴侶Cdc37存在共定位且存在蛋白相互作用,其磷酸化分別受PKA抑制劑H-89和PKC抑制劑Go6983抑制;17-AAG抑制酪氨酸蛋白激酶Src活性位點Y416的磷酸化。精子存在蛋白棕櫚酰化,Hsp90棕櫚酰化水平在獲能培養(yǎng)后增加。結(jié)論成功建立了基于孕酮的精子優(yōu)選新方法,可提高精子質(zhì)量;孕酮調(diào)節(jié)精子功能受Hsp90介導(dǎo),Hsp90與共伴侶Cdc37發(fā)生相互作用、在精子獲能期間發(fā)生棕櫚;⑵淞姿峄躊KA和PKC調(diào)節(jié),進而調(diào)節(jié)Src活性。 

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