精子優(yōu)選新方法建立及相關(guān)調(diào)節(jié)機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2022-10-04 21:59
目的建立一種人精子優(yōu)選方法并研究相關(guān)調(diào)節(jié)機(jī)制。方法設(shè)計(jì)制作一種新裝置,利用孕酮進(jìn)行條件優(yōu)化,通過(guò)精子濃度檢測(cè)驗(yàn)證方法可行性,同時(shí)檢測(cè)精子優(yōu)選前后的形態(tài)、DNA片段和凋亡狀態(tài)以評(píng)價(jià)優(yōu)選效果;進(jìn)一步用特異性抑制劑格爾德霉素和(或)17-AAG研究了與孕酮作用相關(guān)的熱休克蛋白90(Hsp90)調(diào)節(jié)精子功能相關(guān)分子機(jī)制。結(jié)果確立了優(yōu)選人精子方法的實(shí)驗(yàn)條件,經(jīng)所建立方法優(yōu)選后,形態(tài)正常和DNA完整的人精子比例增加,凋亡狀態(tài)沒(méi)有顯著變化。格爾德霉素抑制孕酮誘發(fā)的人精子獲能、活力及超激活運(yùn)動(dòng)。Hsp90與共伴侶Cdc37存在共定位且存在蛋白相互作用,其磷酸化分別受PKA抑制劑H-89和PKC抑制劑Go6983抑制;17-AAG抑制酪氨酸蛋白激酶Src活性位點(diǎn)Y416的磷酸化。精子存在蛋白棕櫚;,Hsp90棕櫚;皆讷@能培養(yǎng)后增加。結(jié)論成功建立了基于孕酮的精子優(yōu)選新方法,可提高精子質(zhì)量;孕酮調(diào)節(jié)精子功能受Hsp90介導(dǎo),Hsp90與共伴侶Cdc37發(fā)生相互作用、在精子獲能期間發(fā)生棕櫚;、其磷酸化受PKA和PKC調(diào)節(jié),進(jìn)而調(diào)節(jié)Src活性。
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本文編號(hào):3685834
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