目的應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOFMS）分析屎腸球菌血流感染后不同時間點小鼠的血清多肽指紋圖譜,篩選差異多肽峰,建立相應(yīng)的診斷模型并尋找新的標(biāo)志物。方法 90只ICR小鼠分為對照組（10只）與感染組（80只）。其中,對照組注射無菌磷酸緩沖鹽溶液（PBS）,感染組注射1/2 LD50的菌液,注射量均為0.1 ml/10 g,分別于8個時間點（感染后1、3、6、12、24、48、96、128 h）收集血液標(biāo)本檢測白細(xì)胞介素（IL）-1α、IL-1β和IL-6水平。收集血清標(biāo)本,經(jīng)弱陽離子磁珠純化后,行MALDI-TOF MS檢測,并采用BioExplorer軟件分析屎腸球菌感染組與對照組的血清多肽指紋圖譜。應(yīng)用納米液相色譜-電噴霧電離-串聯(lián)質(zhì)譜對候選多肽氨基酸序列進行鑒定。結(jié)果與對照組相比,感染組小鼠精神萎靡,活動減少;其血液中IL-1α含量呈下降趨勢,IL-1β和IL-6呈上升趨勢。分析多肽指紋圖譜,共檢測到102個血清多肽峰,以感染組與對照組含量相差5倍為基準(zhǔn)篩選出了8個感染組高于對照組的多肽（P<0.01）,9個感染組低于對照組的多肽（P<0.0... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 菌株來源及實驗動物
        1.1.2 儀器及試劑
    1.2 方法
        1.2.1 屎腸球菌半數(shù)致死量(median lethal dose,L D5 0)測定
        1.2.2 血流感染小鼠模型的建立
        1.2.3 血清多肽提取
        1.2.4 MALDI-TOF MS分析及數(shù)據(jù)處理
        1.2.5 候選多肽質(zhì)譜鑒定
        1.2.6 IL-1α、IL-1β和IL-6濃度測定
    1.3統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 小鼠感染后體征
    2.2 各組小鼠IL-1α、IL-1β和IL-6檢測結(jié)果
    2.3 血清多肽質(zhì)譜圖檢測及差異多肽分析
        2.3.1 感染組與對照組樣本血清多肽質(zhì)譜圖的檢測
        2.3.2 兩組樣本的差異多肽分析
        2.3.3 多肽指紋圖譜診斷模型的建立
        2.3.4 候選多肽的鑒定
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3671722