發(fā)布時(shí)間：2022-07-01 10:05

　　目的:探討C末端驅(qū)動(dòng)蛋白1（KIFC1）在精子頂體形成過(guò)程中的時(shí)空表達(dá)特征及其功能。方法:利用流式分選及免疫熒光技術(shù),分析KIFC1在精子頂體形成過(guò)程中的表達(dá)和定位。運(yùn)用體外GC2-spd細(xì)胞系篩選出具有高干擾效率的KIFC1的小干擾RNA（RNAi1）,將混有0.5%臺(tái)盼藍(lán)的KIFC1 RNAi1,顯微注射至3周齡Balb/c小鼠的睪丸生精小管內(nèi),同一只對(duì)側(cè)睪丸注射陰性Con-RNAi;在注射后3周后,取附睪尾部精子進(jìn)行形態(tài)學(xué)分析。結(jié)果:精子變形早期,KIFC1蛋白主要表達(dá)于精子細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中;變形中期,KIFC1蛋白表達(dá)于頂體泡及頂體;變形晚期,KIFC1蛋白主要表達(dá)于殘余體內(nèi);成熟期,KIFC1蛋白在精子表達(dá)消失。RNAi1組的精子頭部畸形率明顯高于對(duì)照[（32.12±0.25）%vs（7.06±1.25）%,P<0.01]。結(jié)論:KIFC1在精子頂體形成過(guò)程中可能發(fā)揮重要作用,主要影響精子頂體的形成。 

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 人睪丸組織樣本
        1.1.2 細(xì)胞系及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.1.3 試劑與儀器
    1.2 方法
        1.2.1 流式細(xì)胞儀分選人精原細(xì)胞、精母細(xì)胞及單倍體精子細(xì)胞
        1.2.2 免疫熒光染色
        1.2.3 脂質(zhì)體介導(dǎo)包被的RNAi-KIFC 1 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染 GC-2 spd 細(xì)胞
        1.2.4 Balb/c小鼠睪丸網(wǎng)顯微注射及小鼠精子畸形率的檢測(cè)
        1.2.5 Balb/c小鼠附睪精子透射電鏡制樣與觀察
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 流式細(xì)胞儀分選人精原細(xì)胞、精母細(xì)胞及單倍體精子細(xì)胞
    2.2 KIFC1在人睪丸中的表達(dá)和定位
    2.3 KIFC1在人精子頂體形成過(guò)程中的時(shí)空表達(dá)
    2.4 Balb/c小鼠睪丸生精小管微注射Kifc1 RNAi1
    2.5 KIFC1在小鼠精子變形中的功能
    2.6 小鼠附睪精子透射電鏡結(jié)果
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]泛素-蛋白酶體系統(tǒng)與精子DNA損傷修復(fù)的研究進(jìn)展[J]. 張國(guó)巍,蔡鴻財(cái),商學(xué)軍.  中華男科學(xué)雜志. 2016(09)
[2]復(fù)方氨基酸膠囊聯(lián)合維生素E治療特發(fā)性弱精子癥的臨床研究[J]. 周青松,曾凡春,張禎雪,周波,孫中義.  中華男科學(xué)雜志. 2016(04)
[3]Y染色體多態(tài)性與臨床遺傳效應(yīng)的關(guān)系[J]. 李中文.  山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(08)
[4]不同來(lái)源凍融精子行卵胞漿內(nèi)單精子注射的臨床結(jié)局分析[J]. 宋文妍,趙萬(wàn)里,楊慶嶺,孫瑩璞,姚桂東,楊洪毅,金海霞,辛志敏.  鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2014(06)



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