人巨細胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）是一種雙鏈的DNA病毒,屬于β皰疹病毒亞科。CX43屬于縫隙鏈接蛋白家族成員,有關實驗數(shù)據(jù)表明HCMV能夠下調CX43的表達水平。NMDARS為在神經(jīng)細胞中發(fā)現(xiàn)的谷氨酸受體和離子通道蛋白,其表達與學習記憶能力有著密切的聯(lián)系。IE2由病毒基因UL122編碼,在病毒的復制和許多疾病的病理過程中起到重要作用。先前的研究表明,在孕婦中,原發(fā)或新的HCMV感染均可引起新生兒宮內感染或圍產(chǎn)期感染,可導致胎兒畸形,智力低下或發(fā)育遲緩等。據(jù)報道,HCMV孕期感染與新生兒遲發(fā)性神經(jīng)損傷密切相關,先天性HCMV感染導致學習和記憶障礙,但HCMV IE2是否在這一過程中起關鍵作用尚不清楚。由于種屬特異性,先前對HCMV IE2的研究僅限于細胞和分子水平。為了進一步在整體水平上研究HCMV IE2是否通過影響轉基因小鼠海馬神經(jīng)元NMDA受體和CX43表達水平來間接影響小鼠的學習記憶能力首先,建立了能穩(wěn)定持續(xù)表達IE2蛋白的ul122轉基因小鼠模型。然后將小鼠分為實驗組（陽性小鼠）和對照組（野生型小鼠）。每個組n=24。用PCR技術鑒定了ul1... 

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
實驗材料
    1 實驗動物
    2 主要實驗儀器及材料
    3 主要實驗試劑來源及配制方法
實驗方法
    1 ul122轉基因鼠建模、繁殖和鑒定
    2 水迷宮實驗測試轉基因鼠的學習記憶能力
    3 小鼠海馬HE染色,觀察IE2對小鼠海馬細胞形態(tài)影響
    4 Western-blot檢測IE2對小鼠海馬CX43蛋白表達的影響
    5 免疫組化檢測IE2、CX43、NMDARS在ul122轉基因陽性鼠和WT野生型鼠中的差別
    6 統(tǒng)計學分析
結果與分析
    1 轉基因鼠DNA的提取和PCR
    2 水迷宮實驗測試空間記憶能力在野生型和UL122陽性轉基因鼠中的差別
    3 HE(hematoxylin-eosin)染色顯示IE2造成了UL122轉基因小鼠海馬神經(jīng)元的損傷
    4 免疫組化分別觀察IE2在幼齡鼠、成年鼠、老齡鼠中的表達情況
    5 免疫組化結果顯示IE2在UL122轉基因鼠海馬組織中下調了CX43的表達
    6 免疫組化結果顯示IE2在UL122轉基因鼠海馬組織中下調了NR1的表達
討論
結論
參考文獻
綜述
    綜述參考文獻
攻讀學位期間研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Immediate–Early（IE） gene regulation of cytomegalovirus:IE1-and pp71-mediated viral strategies against cellular defenses[J]. Lilith Torres,Qiyi Tang.  Virologica Sinica. 2014(06)



本文編號：3650483