目的構(gòu)建成纖維細(xì)胞生長因子10（FGF10）的載體pcDNA3.0-FGF10,觀察FGF10在體內(nèi)外的生物學(xué)作用。方法人早胚組織總RNA,擴(kuò)增得到人FGF10cDNA片段并將其插入載體pcDNA3.0中,構(gòu)建成pcDNA3.0-FGF10重組真核表達(dá)載體。將其轉(zhuǎn)染入人胚源間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）,得到pcDNA3.0-FGF10-MSC。利用免疫熒光、反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、Western-blot等方法鑒定轉(zhuǎn)染效果。結(jié)果成功構(gòu)建能持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白FGF10的重組質(zhì)粒表達(dá)載體pcDNA3.0-FGF10-MSC。結(jié)論成功構(gòu)建并轉(zhuǎn)染質(zhì)粒載體,為觀察FGF10在體內(nèi)外的生物學(xué)作用提供了實驗工具。 

【文章來源】：檢驗醫(yī)學(xué)與臨床. 2019,16(24)

【文章頁數(shù)】：3 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 人FGF-10cDNA的克隆及pcDNA3.0-FGF10的構(gòu)建
        1.2.2 重組質(zhì)粒體外轉(zhuǎn)染MSC
        1.2.3轉(zhuǎn)染基因蛋白表達(dá)
    1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 重組質(zhì)粒pcDNA3.0-FGF10的鑒定
    2.2 重組表達(dá)載體pcDNA3.0-FGF10-MSC的鑒定
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]成纖維細(xì)胞生長因子的代謝作用研究進(jìn)展[J]. 竇易銘,白潔,李光明.  山東醫(yī)藥. 2018(39)
[2]成纖維細(xì)胞生長因子10的功能及機(jī)制進(jìn)展[J]. 陳巍,傅海龍,田謀利,李盈科,袁紅斌,李永華.  國際麻醉學(xué)與復(fù)蘇雜志. 2018 (06)
[3]腫瘤環(huán)境下人類脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的旁分泌特征變化與腫瘤細(xì)胞侵襲的關(guān)系分析[J]. 彭大穎,吳迪.  中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用. 2017(07)



本文編號：3634174