目的:分離、培養(yǎng)及鑒定人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞（Human amonionmesenchymal stem cells,h AMSCs）,收集其條件培養(yǎng)上清液（Conditioned medium of h AMSCs,h AMSCs-CS）;探討h AMSCs-CS是否具有抑制痤瘡丙酸桿菌生長的作用。方法:采用機(jī)械分離聯(lián)合二酶消化法從人羊膜組織中分離、提取h AMSCs,利用流式細(xì)胞術(shù)及波形蛋白免疫組化對h AMSCs進(jìn)行鑒定,收集各代h AMSCs-CS。將收集好的各代上清液常溫解凍,使用涂抹法直接觀察上清液是否具有抑制痤瘡丙酸桿菌生長作用,進(jìn)一步使用打孔法測量抑菌圈大小,根據(jù)藥敏實驗判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行藥敏結(jié)果判斷,采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果:hAMSCs呈典型的貼壁生長,細(xì)胞呈纖維狀,長梭型,高表達(dá)CD90、CD105、CD73,幾乎不表達(dá)CD34、CD11b、CD19、CD45和HLA-DR,波形蛋白表達(dá)陽性;抹藥法顯示原代—2代h AMSCs-CS組有細(xì)菌生長,但3—5代h AMSCs-CS抹藥組無細(xì)菌生長。打孔法顯示原代—2代h AMSCs-CS及生理鹽水組無抑菌圈形成... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞生長形態(tài)學(xué)（×100）

圖 1：人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞生長形態(tài)學(xué)（×100）注：圖 A 示原代 hAMSCs 形態(tài)，呈梭型、多角形、星形；圖 B 示第 3 代 hAMSCs 態(tài)，呈單層放射狀或漩渦狀生長，以梭型為主。2.2 免疫細(xì)胞化學(xué)染色 hAMSCs 波形蛋白情況鏡下觀察到第 4 代 hAMSCs 經(jīng)過波形蛋白 DAB 染色后變成淺紅色，結(jié)果呈陽性而對照組沒有發(fā)生顯色反應(yīng)（圖 2）

流式細(xì)胞結(jié)果顯示人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞高表達(dá)CD90、CD105、CD73、CD44；幾乎不表達(dá)CD34、CD11b、CD19、CD45及HLA-DR

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]殼聚糖創(chuàng)傷敷料用于調(diào)Q激光術(shù)后創(chuàng)面修復(fù)的分析[J]. 陳靜,桑忠強(qiáng),沈帥帥,何勤國.  世界復(fù)合醫(yī)學(xué). 2017(02)
[2]痤瘡患者痤瘡丙酸桿菌對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的敏感性分析[J]. 孫菲,凌勇活,李明,張霞,阮建波.  皮膚性病診療學(xué)雜志. 2016(04)
[3]人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)上清液對人成纖維細(xì)胞生物學(xué)功能的影響[J]. 吳騏而,呂璐,辛海明,羅亮,童亞林,莫永亮,岳毅剛.  中華燒傷雜志. 2016 (06)
[4]痤瘡丙酸桿菌抗生素耐藥的研究進(jìn)展[J]. 王奇颯,孫東杰.  皮膚病與性病. 2015(06)
[5]痤瘡丙酸桿菌對米諾環(huán)素的敏感性研究[J]. 梅嬛,沈永年,呂桂霞,蔡晴,劉維達(dá).  中國麻風(fēng)皮膚病雜志. 2015(04)
[6]武漢地區(qū)痤瘡患者皮損中分離的丙酸桿菌耐藥性分析[J]. 曾憲玉,姜敏,付辰,吳卓璇,劉雯,董碧麟,曾志良,王瑋蓁.  中國皮膚性病學(xué)雜志. 2014(02)
[7]人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性及臨床前研究[J]. 付蒙,張艷梅,王佃亮,曾虹燕,孫晉偉.  中國生物工程雜志. 2011(12)
[8]應(yīng)用抗生素治療痤瘡可能并發(fā)上呼吸道感染[J]. Margolis D.J.,Bowe W.P.,Hoffstad O.,Berlin J.A.,潘敏.  世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(皮膚病學(xué)分冊). 2006(04)
[9]美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)委員會推薦藥敏試驗操作方法和判斷標(biāo)準(zhǔn)（2005年修訂版）[J]. 馬越,李景云,金少鴻.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2005(17)



本文編號：3609141