目的采用形態(tài)與分子的鑒定方法對(duì)在中山市不同生境采集的庫蠓進(jìn)行鑒定,明確中山市庫蠓的種類。方法 2018年4月至2019年3月在中山市采集庫蠓樣本,采用不損傷外部形態(tài)的方法提取基因組DNA,用線粒體細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅰ（COI）基因和線粒體DNA細(xì)胞色素b（Cytb）基因特異引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增和序列測(cè)定,用DNAMAN V6和Mega 6.1軟件進(jìn)行構(gòu)建N-J樹。然后將庫蠓蟲體壓片,在體視顯微鏡下進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。結(jié)果共采集到的104只庫蠓,鑒定結(jié)果為原野庫蠓Culicoides homotomus、蘇島庫蠓Culicoides sumatrae、異域庫蠓Culicoides peregrinus、琉球庫蠓Culicoides actoni、殘肢庫蠓Culicoides imicola、連斑庫蠓Culicoides jacobsoni、撫須庫蠓Culicoides palpifer、荒川庫蠓Culicoides arakawai、環(huán)斑庫蠓Culicoides circumscriptus、尖喙庫蠓Culicoides oxystoma、霍飛庫蠓Culicoides huffi、似同庫蠓C... 

【文章來源】：中國人獸共患病學(xué)報(bào). 2019,35(11)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

12種庫蠓一側(cè)翅圖

將本研究12種庫蠓的全部Cytb序列與GenBank數(shù)據(jù)庫中的序列進(jìn)行同源比對(duì),荒川庫蠓、殘肢庫蠓Cytb序列相似度皆大于98%,說明該2種庫蠓的形態(tài)鑒定結(jié)果與GenBank數(shù)據(jù)庫中的Cytb基因序列比對(duì)結(jié)果一致。其余10種庫蠓原野庫蠓、蘇島庫蠓、異域庫蠓、琉球庫蠓、殘肢庫蠓、連斑庫蠓、撫須庫蠓、荒川庫蠓、環(huán)斑庫蠓、尖喙庫蠓、霍飛庫蠓、似同庫蠓在GenBank中均未收錄有Cytb基因序列。2.3.3 Cytb聚類分析

基于Cytb聚類分析表明(圖3),不同種類蠓間無交叉,且相同種類蠓的不同個(gè)體均聚在同一分支下,支持率均達(dá)到99%,說明Cytb基因在不同蠓種間有明顯差異,可以用于鑒定和區(qū)分蠓種。庫蠓屬與蠛蠓屬、鋏蠓屬、裸蠓屬、阿蠓屬混在不同支序內(nèi),但因支持度低(<10%),無法說明其親緣關(guān)系,說明Cytb不適合進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系分析,對(duì)上述4屬并入庫蠓屬的現(xiàn)象,與本研究COI聚類分析的研究結(jié)果一致。撫須庫蠓、霍飛庫蠓、荒川庫蠓、環(huán)斑庫蠓雌蟲Cytb基因序列與雄蟲序列聚在同一分支下且相似度98%以上,說明同一種的雌雄庫蠓之間Cytb基因的差異小于種間的差異,可以用于雌蟲的種類鑒定。3 討 論

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]云南省華寧縣荒川庫蠓形態(tài)和遺傳多態(tài)性研究[J]. 王靜林,李順祥,葉紹飛,李楠,何于雯,李華春.  中國國境衛(wèi)生檢疫雜志. 2018(01)
[2]DNA條形碼技術(shù)在小花蝽屬昆蟲分類鑒定中的應(yīng)用[J]. 胡澤章,孫猛,呂兵,段敏,翟一凡,陳浩,鄭禮,于毅.  中國生物防治學(xué)報(bào). 2017(04)
[3]巨癤蝙蛾不同蟲態(tài)的COI基因條形碼識(shí)別[J]. 陳珊,周瓊,李綱.  昆蟲學(xué)報(bào). 2017(06)
[4]基于DNA條形碼麗蠅科49種常見種的分類鑒定[J]. 邱德義,廖俊蕾,魏曉雅,岳巧云.  中國媒介生物學(xué)及控制雜志. 2017(04)
[5]德國小蠊及其近緣種的形態(tài)和分子鑒定[J]. 邱德義,魏曉雅,吳可量,岳巧云.  中國媒介生物學(xué)及控制雜志. 2017(03)
[6]新截獲中國未見分布種杜比亞麗蠅形態(tài)和DNA條形碼鑒定[J]. 廖俊蕾,岳巧云,邱德義,魏曉雅,劉德星,賈鳳龍.  中國媒介生物學(xué)及控制雜志. 2014(06)
[7]分子生物學(xué)技術(shù)在按蚊近緣種鑒定的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 鐘敏,藺應(yīng)學(xué),王英.  中國熱帶醫(yī)學(xué). 2014(12)
[8]DNA條形碼技術(shù)應(yīng)用于口岸吸血蠓類快速分子鑒定的研究[J]. 賀驥,宋福春,蘇水寬,王長軍,陳劍,陳慧,馮梅,傅健.  中華衛(wèi)生殺蟲藥械. 2014(02)
[9]應(yīng)用DNA條形碼技術(shù)鑒定未知雙翅目蛹[J]. 岳巧云,邱德義,黃藝文,侯捷,劉國雄,胡龍飛.  中國國境衛(wèi)生檢疫雜志. 2011(05)
[10]線粒體DNA基因序列在昆蟲分子系統(tǒng)學(xué)研究中的應(yīng)用[J]. 王德明,林楊.  廣東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(06)



本文編號(hào)：3558405