目的:比較不同劑量H22傳代小鼠腹水細(xì)胞構(gòu)建原位肝癌移植模型小鼠的成瘤率、腹水率及存活率,以期構(gòu)建和完善該模型。方法:115只C57BL6/J小鼠隨機(jī)分為三組（10μL組、20μL組、30μL組）,選取濃度為1×1013/m L的H22傳代小鼠腹水細(xì)胞沿肝長軸直接注射接種到肝臟實(shí)質(zhì)內(nèi),每組分別于第10、20 d隨機(jī)選取15只給予麻醉后脫頸椎處死,肝臟稱重,測量瘤體體積及重量,觀察肝臟外觀及病理學(xué)改變,每組預(yù)留5只觀察其存亡天數(shù),計(jì)算成瘤率、腹水率及存活率。結(jié)果:115只模型小鼠有114只均可見腫瘤,成瘤率99%;10μL組腹水率7%,20μL組腹水率46%,30μL組腹水率63%。結(jié)論:使用10μL濃度為1×1013/m L的H22傳代小鼠腹水細(xì)胞懸液建立小鼠原位肝癌模型,其成瘤率高,腹水率低,存活時(shí)間較長,是較為理想的肝癌小鼠模型。 

【文章來源】：成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2016,39(04)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

各組小鼠肝臟重量的比較見表2，空白組前后

位肝癌造模的影響研究表2各組小鼠肝臟的重量變化情況(x珋±s，單位:g)分組n10d20d空白組101.38±0.091.38±0.0810μL組301.34±0.121.47±0.21*～20μL組301.44±0.16*＇1.68±0.28*＇～30μL組301.62±0.12*＇※2.01±0.45*＇※～注:10μL組與空白組比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:*P＜0.05;與20μL組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:＇P＜0.05;與30μL組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:※P＜0.05;與第10d比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:～P＜0.052.5成瘤小鼠的瘤體的體積與瘤重的比較瘤體體積的測量如圖3，圖4，圖5。3組成瘤小鼠瘤體體積的比較見表3，各組間以及組間前后兩兩比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，結(jié)果表明隨著接種越大劑量H22肝癌細(xì)胞株瘤體的體積越大。3組成瘤小鼠的瘤體體積比較見表4，各組間以及組間前后兩兩比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，結(jié)果表明接種越大劑量H22肝癌細(xì)胞株瘤體的重量越大。圖3圖4圖5表33組成瘤小鼠瘤體的體積情況(x珋±s，單位:cm3)分組n10d20d10μL組150.24±0.020.26±0.0520μL組150.47±0.14＇0.64±0.27＇～30μL組150.73±0.14＇※1.03±0.34＇※～注:10μL組與20μL組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:＇P＜0.05;與30μL組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:※P＜0.05;與第10天比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:～P＜0.05表43組成瘤小鼠瘤體的重量情況(x珋±s單位:g)分組n10d20d10μL組150.29±0.040.32±0.07～10μL組150.52±0.05＇0.59±0.12＇～10μL組150.61±0.08＇※0.78±0.21＇※～注:10μL組與20μL組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:＇P＜0.05;與30μL組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:※P＜0.05;與第10d比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:～P＜0.052.6小鼠肝癌移植后肝臟病理形態(tài)學(xué)在電鏡分

成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)2016年第39卷BCD圖A、B、C、D組分別為電鏡下HE×100、HE×200、HE×400，ABC分別為10μL組、20μL、20μL組，D為正常對(duì)照組圖1電鏡下小鼠肝癌移植后肝臟病理形態(tài)學(xué)3討論H22肝癌細(xì)胞屬于種植腹水型肝癌細(xì)胞，目前國內(nèi)外各實(shí)驗(yàn)室在以往的制造肝癌模型的過程中，多因沒有很好的解決H22肝細(xì)胞濃度和注射劑量的問題從而導(dǎo)致造模成瘤率很低。經(jīng)過前期不同濃度的實(shí)驗(yàn)探索［12］，使用不同濃度造模成瘤率較低，并且成瘤時(shí)間長。故筆者在前期的實(shí)驗(yàn)探索中選用同一濃度不同劑量的H22傳代小鼠腹水細(xì)胞造模，可縮短成瘤的時(shí)間，提高成瘤率。從19世紀(jì)到20世紀(jì)初，經(jīng)過各國有許多實(shí)驗(yàn)室不斷地努力，終于制作出小鼠自發(fā)性肝癌模型，對(duì)肝癌動(dòng)物模型建立，各國科研人員經(jīng)過不斷探尋，逐步建立了動(dòng)物的誘發(fā)性、移植性、自發(fā)性、人類肝癌的異種移植模型以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物肝癌模型［18-19］。對(duì)于以上肝癌動(dòng)物模型的認(rèn)識(shí)，其中原位移植瘤模型具有較快的生長速度、較強(qiáng)的侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移能力，其腫瘤細(xì)胞的發(fā)生、發(fā)展的微環(huán)境與人體腫瘤在體內(nèi)生長環(huán)境具有很大的相似，故是目前研究腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的最佳模型選擇。然而選用大鼠進(jìn)行原位移植性肝癌模型造模方法的報(bào)道也有許多［20-21］，主要是手術(shù)便于操作，飼養(yǎng)方便，接植移植方法多樣，成功率高，病死率較低以及成瘤的瘤體較大，利于取組織等好處。但是利用小鼠建立肝癌動(dòng)物模型更適合藥物篩選和大量實(shí)驗(yàn)性治療研究。因此我們采用C57BL/6J小鼠建立肝癌移植模型。·12·

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]不同濃度H22肝癌細(xì)胞株對(duì)C57BL/6J小鼠原位肝癌造模差異的影響[J]. 柏燦,王穎,賈亞妹,薛紅,陳莎莎.  成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(04)
[2]小鼠肝癌原位移植模型的建立及其意義的研究[J]. 項(xiàng)亮亮,侯杰,王婕,焦成斌.  黑龍江醫(yī)藥科學(xué). 2015(06)
[3]大鼠肝癌細(xì)胞C2不同途徑接種造模及比較[J]. 阮思蓓,李世寧,朱小霞,倪江濤,劉勇,唐紅,張?jiān)?唐明希.  臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2013(02)
[4]BALB/c裸鼠與SCID小鼠皮下種植人肝癌模型的比較[J]. 白建華,李立,李曉延,朱新鋒,陳剛.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2011(31)
[5]移植瘤體積不同計(jì)測方法的比較[J]. 何志軍,陳先祥,蔡慶和,于洋,唐俊明,楊建業(yè),程彩濤,王家寧.  中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2009(09)
[6]Mouse models in liver cancer research:A review of current literature[J]. Martijn WH Leenders,Maarten W Nijkamp,Inne HM Borel Rinkes.  World Journal of Gastroenterology. 2008(45)
[7]醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)肝癌動(dòng)物模型的研究進(jìn)展[J]. 陳謙,孫慧,李強(qiáng).  中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2006(03)
[8]大白鼠轉(zhuǎn)移性肝癌模型的制作[J]. 楊繼金,朱永法,左長京,劉崎,田建民,王振堂,賈雨辰.  中華放射學(xué)雜志. 1993 (02)



本文編號(hào)：3533098