內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的穩(wěn)態(tài)平衡對于細(xì)胞行使功能和細(xì)胞存活至關(guān)重要,其穩(wěn)態(tài)的失衡會(huì)致使細(xì)胞發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,并激活未折疊蛋白反應(yīng)（UPR）。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中,未折疊蛋白反應(yīng)分為三條信號(hào)通路:PERK-eIF2α、IRE1α-XBP1、ATF6。三條通路共同作用,維持內(nèi)質(zhì)網(wǎng)穩(wěn)態(tài)平衡。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激發(fā)生早期,UPR以促使細(xì)胞存活為主;但是當(dāng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激持續(xù)存在時(shí),UPR無法使細(xì)胞恢復(fù)穩(wěn)態(tài),便誘導(dǎo)細(xì)胞走向凋亡。DDRGK1是錨定在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的膜蛋白,其PCI結(jié)構(gòu)域使DDRGK1與UFL1、C53、UFSP2形成蛋白復(fù)合體,在Ufmylation修飾系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用。Ufmylation修飾是新近發(fā)現(xiàn)的類泛素化修飾,其作用的底物蛋白目前只鑒定了兩個(gè)。DDRGK1作為Ufmylation修飾的兩個(gè)底物之一,還是Ufmylation修飾系統(tǒng)所必需的組分,參與其他底物的修飾調(diào)控。然而,其具體的生物學(xué)功能還知之甚少。在本次研究中,我們發(fā)現(xiàn)沉默DDRGK1會(huì)顯著抑制IRE1α-XBP1信號(hào)通路,并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。我們進(jìn)一步證明了DDRGK1與IRE1α存在相互作用和細(xì)胞共定位,并且DDRGK1可以調(diào)控IRE1α蛋白水平穩(wěn)定性。綜... 

【文章來源】：杭州師范大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

未折疊蛋白反應(yīng)信號(hào)通路圖

沉默DDRGK1誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡(A)用si-NC和si-DDRGK1處理MCF-7細(xì)胞，72h后用AnnexinV-FITC和PI進(jìn)行染色，并用流式細(xì)胞儀

DDRGK1調(diào)控UPR-IRE1α信號(hào)通路(A)用si-NC或si-DDRGK1處理MCF-7細(xì)胞，72h后用WesternBlot檢測蛋白表達(dá)；(B)用si-NC或si-DDRGK1處理MCF-7細(xì)胞，分別在處理8h，24h，48h，72h收細(xì)胞，RT-PCR檢測XBP1mRNA表達(dá)；(C,D)


本文編號(hào)：3526584