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人臍帶血內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定

發(fā)布時(shí)間:2021-11-26 20:49
  目的從健康足月新生兒臍帶血中分離內(nèi)皮祖細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)鑒定,為后期研究提供細(xì)胞來(lái)源。方法采用密度梯度離心法獲取單個(gè)核細(xì)胞,接種在鼠尾Ⅰ型膠原包被的培養(yǎng)板中,用內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)液EGM-2(endothelial cell growth medium-2)培養(yǎng),觀察臍帶血來(lái)源的內(nèi)皮祖細(xì)胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)增殖生長(zhǎng)情況,通過(guò)觀察細(xì)胞形態(tài)、雙熒光染色法、免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色法及流式細(xì)胞儀等技術(shù)對(duì)培養(yǎng)的內(nèi)皮祖細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果人臍帶血可分離獲得內(nèi)皮祖細(xì)胞;臍帶血內(nèi)皮祖細(xì)胞在培養(yǎng)10~21 d出現(xiàn),表現(xiàn)為貼壁和典型的"鋪路石樣"形態(tài)。采用雙熒光染色法、免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色法及流式細(xì)胞儀可鑒定EPCs。結(jié)論采用密度梯度離心法可獲得較好的人臍帶血來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞。 

【文章來(lái)源】:齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2020,41(04)

【文章頁(yè)數(shù)】:4 頁(yè)

【部分圖文】:

人臍帶血內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定


EPCs的形態(tài)學(xué)變化

生長(zhǎng)曲線,生長(zhǎng)曲線,細(xì)胞,高峰


EPCs生長(zhǎng)曲線(d)

人臍帶血內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定


FITC-UEA-Ⅰ和DiI-AcLDL雙染色結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]凍存臍帶血中內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離培養(yǎng)及生物學(xué)特性鑒定[J]. 付亞茹,孫陽(yáng)陽(yáng),王洪星,劉小盾,曲廷瑜.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2019(01)
[2]循環(huán)內(nèi)皮祖細(xì)胞與腦梗死急性期神經(jīng)功能缺損癥狀的關(guān)系研究[J]. 鐘平,劉時(shí)華,程燕,汪國(guó)勝,馬爭(zhēng)飛,張蕾.  中華全科醫(yī)學(xué). 2017(08)
[3]內(nèi)皮祖細(xì)胞攜帶KAI1/CD82基因?qū)θ吮茄拾┘?xì)胞裸鼠模型肺轉(zhuǎn)移的影響[J]. 汪庚明,周燕,孫謙,徐洪波,查從亮,江浩,項(xiàng)平,陳振東.  臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2017(03)
[4]兩種不同內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定[J]. 陳靜園,趙海恩,吳赪,閆君,尹鄲丹,嚴(yán)學(xué)倩,梁英民.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2015(26)
[5]人外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定[J]. 喬威,冉峰,劉長(zhǎng)建.  中國(guó)組織工程研究. 2013(36)
[6]大鼠骨髓與外周血來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞生物學(xué)特性比較[J]. 曹廣煜,陳慶偉,李興升,楊彥,李桂瓊.  中國(guó)組織工程研究. 2013(06)
[7]微孔法分離大鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞[J]. 王佐,童中藝,周曉峰,姜志勝,唐朝克,宋硯明,田永鳳.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2007(07)



本文編號(hào):3520900

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