生物體的衰老,作為一種復雜的生物學過程,實際上是由于自身的干細胞衰老而引起的。間充質(zhì)干細胞（mesenchymal stem cells,MSCs）是具有獨特優(yōu)勢的成體干細胞,現(xiàn)已成為以干細胞為基礎(chǔ)的治療策略中不可或缺的重要種子細胞,對維持組織穩(wěn)態(tài)和再生能力必不可少。然而,MSCs在個體自然老化過程中以及體外培養(yǎng)過程中也會發(fā)生衰老。因此,延緩或逆轉(zhuǎn)MSCs衰老是亟待研究與探索的重大科學問題。前期工作中我們發(fā)現(xiàn),在體外MSCs復制性衰老模型中,煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（Nicotinamide phosphoribosyltransferase,Nampt）可以通過介導細胞內(nèi)的NAD⁺合成和Sirt1活性影響MSCs衰老,我們將其稱之為Nampt-NAD⁺-Sirt1軸。Nampt是延緩MSCs衰老的重要調(diào)控因子。那么,哪些因素參與調(diào)控Nampt從而影響MSCs衰老呢?MSCs衰老,不僅受遺傳學調(diào)控,也受控于表觀遺傳學。作為表觀遺傳學調(diào)控的重要機制之一,微小核糖核酸（microRNA,miRNA）參與調(diào)節(jié)機體多種生物學過程,如細胞增殖與分化、細胞衰... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

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自然衰老大鼠模型的評估A.1-2月齡（年輕組,Young,Y）及15-18月齡（衰老組,Old,O）Wistar大鼠

圖 2 各組 MSCs 的形態(tài)學特征A.相差顯微鏡觀察（Bar=50μm） B.細胞表面積 C.細胞長寬比1.2.2 細胞 SA-β-gal 活性檢測衰老細胞所特有的 β-半乳糖苷酶在底物 X-Gal 的催化下會生成深藍色的產(chǎn)。如圖 3A 所示，P3MSCs 中僅存在少數(shù)的藍染細胞，而 P10MSCs 和 OMSCs深藍染的陽性細胞數(shù)目明顯增多。定量分析后發(fā)現(xiàn)，與 P3MSCs 相比，P10MSCs OMSCs 中藍染的陽性細胞比率明顯增加（P<0.01，圖 3B），即衰老細胞顯著加。因此，后續(xù)實驗中我們以 P3MSCs 為年輕細胞，P10MSCs 為復制衰老細，OMSCs 為自然衰老細胞（ 所示即為衰老細胞）。

第 2 章 實驗研究3.2 衰老 MSCs 中 miR-34 Family 的表達miR-34 Family 共包括 miR-34a，miR-34b 和 miR-34c 三個家族成員。應用RT-qPCR 檢測 miR-34 Family 的表達情況。結(jié)果顯示，在 MSCs 自然衰老模型中，與年輕細胞 YMSCs 相比，自然衰老細胞 OMSCs 中 miR-34 Family 成員的表達均明顯上調(diào)（圖 4A），其中以 miR-34a 的表達上調(diào)最為顯著（P<0.01）；在 MSCs復制性衰老模型中，與年輕細胞P3MSCs相比，復制衰老細胞P12MSCs中miR-34Family 成員的表達也均增加（圖 4B），miR-34a 的表達上調(diào)也最為明顯（P<0.01）。因此，后續(xù)實驗中我們將焦點關(guān)注于 miR-34a。


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