發(fā)布時(shí)間：2021-11-10 06:11

　　生物體的衰老,作為一種復(fù)雜的生物學(xué)過(guò)程,實(shí)際上是由于自身的干細(xì)胞衰老而引起的。間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells,MSCs）是具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)的成體干細(xì)胞,現(xiàn)已成為以干細(xì)胞為基礎(chǔ)的治療策略中不可或缺的重要種子細(xì)胞,對(duì)維持組織穩(wěn)態(tài)和再生能力必不可少。然而,MSCs在個(gè)體自然老化過(guò)程中以及體外培養(yǎng)過(guò)程中也會(huì)發(fā)生衰老。因此,延緩或逆轉(zhuǎn)MSCs衰老是亟待研究與探索的重大科學(xué)問(wèn)題。前期工作中我們發(fā)現(xiàn),在體外MSCs復(fù)制性衰老模型中,煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（Nicotinamide phosphoribosyltransferase,Nampt）可以通過(guò)介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)的NAD⁺合成和Sirt1活性影響MSCs衰老,我們將其稱之為Nampt-NAD⁺-Sirt1軸。Nampt是延緩MSCs衰老的重要調(diào)控因子。那么,哪些因素參與調(diào)控Nampt從而影響MSCs衰老呢?MSCs衰老,不僅受遺傳學(xué)調(diào)控,也受控于表觀遺傳學(xué)。作為表觀遺傳學(xué)調(diào)控的重要機(jī)制之一,微小核糖核酸（microRNA,miRNA）參與調(diào)節(jié)機(jī)體多種生物學(xué)過(guò)程,如細(xì)胞增殖與分化、細(xì)胞衰... 

【文章來(lái)源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

自然衰老大鼠模型的評(píng)估A.1-2月齡（年輕組,Young,Y）及15-18月齡（衰老組,Old,O）Wistar大鼠

圖 2 各組 MSCs 的形態(tài)學(xué)特征A.相差顯微鏡觀察（Bar=50μm） B.細(xì)胞表面積 C.細(xì)胞長(zhǎng)寬比1.2.2 細(xì)胞 SA-β-gal 活性檢測(cè)衰老細(xì)胞所特有的 β-半乳糖苷酶在底物 X-Gal 的催化下會(huì)生成深藍(lán)色的產(chǎn)。如圖 3A 所示，P3MSCs 中僅存在少數(shù)的藍(lán)染細(xì)胞，而 P10MSCs 和 OMSCs深藍(lán)染的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目明顯增多。定量分析后發(fā)現(xiàn)，與 P3MSCs 相比，P10MSCs OMSCs 中藍(lán)染的陽(yáng)性細(xì)胞比率明顯增加（P<0.01，圖 3B），即衰老細(xì)胞顯著加。因此，后續(xù)實(shí)驗(yàn)中我們以 P3MSCs 為年輕細(xì)胞，P10MSCs 為復(fù)制衰老細(xì)，OMSCs 為自然衰老細(xì)胞（ 所示即為衰老細(xì)胞）。

第 2 章 實(shí)驗(yàn)研究3.2 衰老 MSCs 中 miR-34 Family 的表達(dá)miR-34 Family 共包括 miR-34a，miR-34b 和 miR-34c 三個(gè)家族成員。應(yīng)用RT-qPCR 檢測(cè) miR-34 Family 的表達(dá)情況。結(jié)果顯示，在 MSCs 自然衰老模型中，與年輕細(xì)胞 YMSCs 相比，自然衰老細(xì)胞 OMSCs 中 miR-34 Family 成員的表達(dá)均明顯上調(diào)（圖 4A），其中以 miR-34a 的表達(dá)上調(diào)最為顯著（P<0.01）；在 MSCs復(fù)制性衰老模型中，與年輕細(xì)胞P3MSCs相比，復(fù)制衰老細(xì)胞P12MSCs中miR-34Family 成員的表達(dá)也均增加（圖 4B），miR-34a 的表達(dá)上調(diào)也最為明顯（P<0.01）。因此，后續(xù)實(shí)驗(yàn)中我們將焦點(diǎn)關(guān)注于 miR-34a。


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