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加味散偏湯對硝酸甘油致偏頭痛模型大鼠行為癥狀及NO,NOS,CGRP含量的影響

發(fā)布時間:2017-05-06 12:08

  本文關(guān)鍵詞:加味散偏湯對硝酸甘油致偏頭痛模型大鼠行為癥狀及NO,NOS,CGRP含量的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的1.觀察不同劑量下的加味散偏湯對硝酸甘油致大鼠偏頭痛模型行為學(xué)的影響。2.研究對硝酸甘油致偏頭痛大血漿NO,NOS,CGRP及三叉神經(jīng)脊束核NOS_1、CGRP含量的影響。3.探討加味散偏湯的鎮(zhèn)痛作用及作用機(jī)制;為加味散偏湯治療偏頭痛病提供堅(jiān)實(shí)的理論依據(jù)。方法1.將大鼠分為空白組、模型組、加味散偏湯高、中、低劑量組、舒巴坦組,以加味散偏湯高、中、低劑量(35.64,17.82,8.91g·kg~(-1)·d~(-1))連續(xù)灌胃給藥5天。硝酸甘油致偏頭痛大鼠實(shí)驗(yàn),末次給藥30min后,出空白組以95%的乙醇2mlg·kg~(-1)皮下注射外,其余各組均ih硝酸甘油10mg·kg~(-1),復(fù)制大鼠偏頭痛模型。2.模型行為學(xué)的測定耳紅觀察大鼠造模后耳紅出現(xiàn)和消失的時間。撓頭從造模之時起,每30min作為1個時間段,從造模開始起以持續(xù)時間分段計(jì)數(shù)的方法觀察大鼠造模后,在每一個時間段里撓頭的次數(shù)。連續(xù)觀察5個時間段,分別記錄4個時間段的撓頭總數(shù)。3.血漿NO、NOS及CGRP水平檢測:大鼠皮下注射硝酸甘油注射劑4h后,麻醉,用注射器腹主動脈采血,分離血漿,測定CGRP及NO、NOS水平。血漿CGRP檢測嚴(yán)格按放射免疫試劑盒操作說明書進(jìn)行。NO和NOS_1水平以可見光分光光度計(jì)法測定,按試劑盒說明書進(jìn)行操作。4.三叉神經(jīng)脊束核NOS_1、CGRP表達(dá)的檢測:采血后對大鼠行主動脈插管,剪開右心耳,灌入含4%多聚甲醛的0.1 mol/LPBS至肝臟變硬,肢體僵直。取出大鼠腦干和延髓尾段放入甲醛溶液中過夜。石蠟包埋后大鼠腦干和延髓尾段,連續(xù)冠狀切片,隔5張取一張。切片脫蠟至水,檸檬酸抗原修復(fù),切片,加抗體。在10倍物鏡下觀察每張切片的NOS_1、CGRP、陽性細(xì)胞,用德國Lecia顯微照相系統(tǒng)采集圖像和分析,熒光鏡下呈紅色的為陽性細(xì)胞,記錄各組圖像陽性細(xì)胞數(shù)。結(jié)果1.對偏頭痛大鼠耳紅出現(xiàn)與消失時間的影響?瞻捉M未出現(xiàn)耳紅的癥狀,其余各組大鼠在10min左右均出現(xiàn)耳紅癥狀,且與模型組相比加味散偏湯高、中劑量組能明顯減緩耳紅出現(xiàn)時間,與舒馬普坦組比較加味散偏湯高、中低劑量組能顯著縮短大鼠耳紅消失時間(P0.01),且中劑量組作用更為顯著。2.對硝酸甘油致偏頭痛大鼠撓頭次數(shù)的影響。注射硝酸甘油造模后,30min內(nèi)各組大鼠撓頭次數(shù)均較空白組明顯增加(P0.01),且各組撓頭次數(shù)無顯著差異,表明造模成功。給藥60min后,加味散偏湯高、中、低劑量組與模型組比較,撓頭次數(shù)均顯著減少(P0.01),與模型組比較,加味散偏湯高、中、劑量組以高劑量組作用最強(qiáng)(P0.01)。3.加味散偏湯對偏頭痛大鼠血漿中NO、NOS、CGRP含量的影響。造模后,大鼠血漿中的NO,NOS,CGRP與空白對照組明顯升高(P0.01),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與模型組比較,加味散偏湯高、中、低劑量組均能不同程度的抑制NO,NOS,CGRP的增加(P0.01),與模型組比較,加味散偏湯以高、中劑量組顯著(P0.01)。4.加味散偏湯對三叉神經(jīng)脊束核NOS_1、CGRP細(xì)胞數(shù)表達(dá)的影響。與空白組相比,經(jīng)免疫熒光法染色后發(fā)現(xiàn)模型組三叉神經(jīng)脊束核NOS_1和CGRP陽性細(xì)胞數(shù)較空白組明顯增加(P0.05,P0.01),加味散偏湯高、中、低劑量組比模型組三叉神經(jīng)脊束核NOS_1和CGRP陽性細(xì)胞數(shù)顯著減少(P0.01)。結(jié)論1、加味散偏湯可有效縮短偏頭痛大鼠耳紅消失的時間,減少偏頭痛大鼠模型的撓頭次數(shù),表明本方能有效緩解偏頭痛大鼠的臨床癥狀。2、加味散偏湯可降低偏頭痛大鼠模型血漿中NO,NOS,CGRP的含量并抑制三叉神經(jīng)脊束核神經(jīng)遞質(zhì)NOS_1和CGRP的激活,從而對抗血管活性物質(zhì)和神經(jīng)遞質(zhì)的失常,調(diào)節(jié)腦及血管功能的紊亂。
【關(guān)鍵詞】:加味散偏湯 偏頭痛 行為學(xué)癥狀 一氧化氮 一氧化氮合酶 降鈣素元相關(guān)肽
【學(xué)位授予單位】:河南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R285.5;R-332
【目錄】:
  • 中英文縮略詞表4-6
  • 摘要6-8
  • Abstract8-11
  • 前言11-13
  • 實(shí)驗(yàn)一 加味散偏湯對硝酸甘油致大鼠偏頭痛模型行為學(xué)的影響13-16
  • 材料與方法13-14
  • 1 材料13
  • 2 方法13-14
  • 結(jié)果14-16
  • 實(shí)驗(yàn)二 加味散偏湯對硝酸甘油致大鼠偏頭痛模型血漿NO,NOS,CGRP含量的影響16-19
  • 材料與方法16-17
  • 1 材料16-17
  • 2 方法17
  • 結(jié)果17-19
  • 實(shí)驗(yàn)三 加味散偏湯對硝酸甘油致大鼠偏頭痛模型三叉神經(jīng)脊束核NOS_1、CGRP陽性細(xì)胞數(shù)的影響19-22
  • 材料與方法19-20
  • 1 材料19
  • 2 方法19-20
  • 結(jié)果20-22
  • 討論22-30
  • 1 立法思想22-25
  • 2 本研究的動物模型、各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的確立思路25-27
  • 3 加味散偏湯對大鼠偏頭痛模型作用機(jī)制的探討27-28
  • 4 加味散偏湯對預(yù)防性治療偏頭痛的探討28-29
  • 5 存在的問題與展望29-30
  • 結(jié)論30-31
  • 致謝31-32
  • 參考文獻(xiàn)32-35
  • 附錄35-44
  • 附錄1 免疫熒光圖片35-37
  • 附錄2 文獻(xiàn)綜述37-44
  • 參考文獻(xiàn)42-44
  • 附錄3 在校期間參編著作及論文與科研44

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本文編號:348363

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