【目的】研究Klf2及Nrf2/Bach1在經(jīng)CSE刺激的大鼠氣道上皮細(xì)胞中的表達(dá)，明確其感受氧化應(yīng)激對靶基因γ-GCS的調(diào)控作用；探討CSE對氣道上皮細(xì)胞凋亡的影響，及其與氧化抗氧化反應(yīng)之間的關(guān)系；觀察KLF2質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后分別對Nrf2、Bach1和γ-GCS表達(dá)水平的影響�！痉椒ā繉�(shí)驗(yàn)分為兩部分。（1）不轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的細(xì)胞部分：采用酶消化法提取大鼠原代氣管-支氣管上皮細(xì)胞，噻唑藍(lán)（MTT）比色法測定10%香煙煙霧提取物（cigarette smoke extract，CSE）在不同時(shí)間點(diǎn)作用于細(xì)胞后對細(xì)胞增殖的影響；選取6小時(shí)時(shí)間點(diǎn)用Hoechst染色觀察細(xì)胞形態(tài)變化；并檢測該時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞活性氧ROS含量；用雙酶法檢測γ-GCS活性；通過免疫細(xì)胞化學(xué)法觀察Nrf2/Bach1的核轉(zhuǎn)位；Western blot、RT-PCR技術(shù)研究細(xì)胞中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS的蛋白及mRNA表達(dá)。（2）轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的細(xì)胞部分：給予Klf2質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞使之基因過表達(dá)，用Western blot、RT-PCR法觀察細(xì)胞中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS的蛋白及mRNA表達(dá)變化�！窘Y(jié)... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
主要縮略詞
中文摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
綜述
    參考文獻(xiàn)
發(fā)表和撰寫的論文
致謝



本文編號：3483035