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KLF2調(diào)控Nrf2/Bach1在CSE誘導(dǎo)的大鼠氣道上皮細(xì)胞氧化與抗氧化機制中的作用

發(fā)布時間:2021-11-08 04:49
  【目的】研究Klf2及Nrf2/Bach1在經(jīng)CSE刺激的大鼠氣道上皮細(xì)胞中的表達,明確其感受氧化應(yīng)激對靶基因γ-GCS的調(diào)控作用;探討CSE對氣道上皮細(xì)胞凋亡的影響,及其與氧化抗氧化反應(yīng)之間的關(guān)系;觀察KLF2質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后分別對Nrf2、Bach1和γ-GCS表達水平的影響!痉椒ā繉嶒灧譃閮刹糠帧#1)不轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的細(xì)胞部分:采用酶消化法提取大鼠原代氣管-支氣管上皮細(xì)胞,噻唑藍(MTT)比色法測定10%香煙煙霧提取物(cigarette smoke extract,CSE)在不同時間點作用于細(xì)胞后對細(xì)胞增殖的影響;選取6小時時間點用Hoechst染色觀察細(xì)胞形態(tài)變化;并檢測該時間點細(xì)胞活性氧ROS含量;用雙酶法檢測γ-GCS活性;通過免疫細(xì)胞化學(xué)法觀察Nrf2/Bach1的核轉(zhuǎn)位;Western blot、RT-PCR技術(shù)研究細(xì)胞中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS的蛋白及mRNA表達。(2)轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的細(xì)胞部分:給予Klf2質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞使之基因過表達,用Western blot、RT-PCR法觀察細(xì)胞中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS的蛋白及mRNA表達變化!窘Y(jié)... 

【文章來源】:南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】:57 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
主要縮略詞
中文摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
實驗結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
附圖
綜述
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本文編號:3483035

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