目的：本課題旨在利用高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)建立兩個(gè)定量代謝組學(xué)方法,研究克羅思�。–rohn’s disease, CD）大鼠模型中代謝物組成的時(shí)間分布規(guī)律,從而找出差異代謝物,全面系統(tǒng)探討2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）誘導(dǎo)的克羅恩病模型對大鼠腸道菌群和機(jī)體的影響。方法：1.建立同時(shí)測定芳香族氨基酸及其腸道菌群-宿主共代謝物的LC-MS/MS方法建立同時(shí)測定大鼠血漿、尿液樣品中3種芳香族氨基酸（AAA）苯丙氨酸（Phe）、色氨酸（Trp）、酪氨酸（Tyr）及4個(gè)腸道菌群宿主共代謝物吲哚（Indole, I）、對甲酚（p-Cresol, PC）、硫酸吲哚（Indoxyl sulfate, ILS）和硫酸對甲酚（p-Cresyl sulfate, PCS）的LC-MS/MS方法。優(yōu)化色譜、質(zhì)譜條件,對方法的線性范圍、精密度、準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性進(jìn)行考察。2.建立同時(shí)測定氨基酸、單胺類神經(jīng)遞質(zhì)和嘌呤嘧啶的親水色譜串聯(lián)質(zhì)譜（HILIC-MS/MS）方法在前期建立利用HILIC-MS/MS測定血清中、腦中24種氨基酸、4種神經(jīng)遞質(zhì)和8中嘌呤嘧啶含量的方法,建立測定尿樣中32中氨基酸、神經(jīng)遞質(zhì)和... 

【文章來源】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 綜述
    1.1 代謝組學(xué)
        1.1.1 非定量代謝組學(xué)與定量代謝組學(xué)
        1.1.2 研究方法
    1.2 克羅恩病
        1.2.1 克羅恩病發(fā)病機(jī)制
        1.2.2 克羅恩病模型
    1.3 內(nèi)源性代謝物
        1.3.1 腸道菌群宿主共代謝物
        1.3.2 氨基酸、單胺類神經(jīng)遞質(zhì)及嘌呤嘧啶
            1.3.2.1 HILIC技術(shù)
第二章 建立同時(shí)測定芳香族氨基酸及其腸道菌群宿主共代謝物的LC-MS/MS方法
    2.1 前言
    2.2 儀器與材料
        2.2.1 儀器
        2.2.2 對照品和試劑
    2.3 方法
        2.3.1 對照品溶液的配制
        2.3.2 樣品處理方法
        2.3.3 色譜和質(zhì)譜條件
        2.3.4 方法學(xué)驗(yàn)證
            2.3.4.1 線性
            2.3.4.2 精密度、準(zhǔn)確度及提取回收率考察
            2.3.4.3 穩(wěn)定性
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 質(zhì)譜條件優(yōu)化
        2.4.2 色譜條件優(yōu)化
        2.4.3 樣品處理方法
        2.4.4 方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果
            2.4.3.1 線性
            2.4.3.2 精密度、準(zhǔn)確度與提取回收率
            2.4.3.3 穩(wěn)定性
    2.5 本章小結(jié)
第三章 建立同時(shí)測定氨基酸、單胺類神經(jīng)遞質(zhì)和嘌呤嘧啶的HILIC-MS/MS方法
    3.1 前言
    3.2 儀器與材料
        3.2.1 儀器
        3.2.2 對照品和試劑
    3.3 方法
        3.3.1 對照品溶液和內(nèi)標(biāo)溶液的配制
        3.3.2 樣品處理方法
        3.3.3 色譜和質(zhì)譜條件
        3.3.4 方法學(xué)驗(yàn)證
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 方法的建立
        3.4.2 方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果
    3.5 本章小結(jié)
第四章 CD大鼠血漿、尿樣中芳香類氨基酸及其共代謝物的靶標(biāo)代謝組學(xué)研究
    4.1 前言
    4.2 儀器與材料
        4.2.1 儀器
        4.2.2 對照品和試劑
        4.2.3 動物
    4.3 方法
        4.3.1 動物實(shí)驗(yàn)
        4.3.2 樣品處理與測定
        4.3.3 數(shù)據(jù)處理
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 CD模型復(fù)制評價(jià)
        4.4.2 多變量統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果
        4.4.3 代謝差異物識別
        4.4.4 差異代謝物生物學(xué)意義解析
    4.5 本章小結(jié)
第五章 CD大鼠血清、尿樣中31種氨基酸和嘌呤嘧啶的靶標(biāo)代謝組學(xué)研究
    5.1 前言
    5.2 儀器與材料
        5.2.1 儀器
        5.2.2 對照品和試劑
        5.2.3 動物
    5.3 方法
        5.3.1 動物實(shí)驗(yàn)
        5.3.2 樣品處理與測定
        5.3.3 數(shù)據(jù)處理
    5.4 結(jié)果與討論
        5.4.1 多變量統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果
        5.4.2 代謝差異物識別
        5.4.3 差異代謝物生物學(xué)意義解析
    5.5 本章小結(jié)
結(jié)語
參考文獻(xiàn)
在校期間發(fā)表論文情況
致謝
附件


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]腸道正常菌群與腸道免疫[J]. 徐凱進(jìn),李蘭娟.  國外醫(yī)學(xué).流行病學(xué)傳染病學(xué)分冊. 2005(03)
[2]提高生物大分子NMR分辨率和靈敏度的有效方法:TROSY和CRINEPT[J]. 周志明,劉買利,張?jiān)S,葉朝輝.  波譜學(xué)雜志. 2004(03)

博士論文
[1]基于液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的代謝組學(xué)新方法的研究與應(yīng)用[D]. 夏建飛.華東理工大學(xué) 2010



本文編號：3480866