多效生長(zhǎng)因子（pleiotrophin,PTN）是一種與Midkine（肝素結(jié)合細(xì)胞因子）同族的肝素結(jié)合因子。多效生長(zhǎng)因子又名為HB-GAM、HBNF、OSF-1和NEGF1等。隨著年齡的增長(zhǎng),PTN的表達(dá)位置也相應(yīng)發(fā)生改變,從胚胎發(fā)育時(shí)期的神經(jīng)及胚胎中胚層,到成年后表達(dá)局限在乳腺、心臟和睪丸等部位。國內(nèi)外研究表明,PTN具有多種生物學(xué)功能,如促有絲分裂、促腫瘤生長(zhǎng)、炎癥發(fā)生、血管生成和骨發(fā)育等。尤其是在多種腫瘤疾病發(fā)生進(jìn)展過程中,均檢測(cè)到多效生長(zhǎng)因子有一定程度的表達(dá),典型的像乳腺癌、胃癌、肝癌和胰腺癌等。這表明PTN可以作為潛在的檢測(cè)腫瘤進(jìn)程的標(biāo)志物,同時(shí)也可以作為腫瘤患者預(yù)后的標(biāo)志。因此,制備多效生長(zhǎng)因子抗體可以在實(shí)驗(yàn)科學(xué)及臨床上得以應(yīng)用,具有一定價(jià)值及意義。本論文首先構(gòu)建pET-28a-his-PTN質(zhì)粒,然后研究在大腸桿菌中利用IPTG誘導(dǎo)多效生長(zhǎng)因子蛋白的表達(dá)條件。其中主要影響因素有誘導(dǎo)前生物量、氧通量、誘導(dǎo)溫度、誘導(dǎo)劑濃度和誘導(dǎo)時(shí)間,并利用均勻設(shè)計(jì)試驗(yàn)成功找出其最優(yōu)表達(dá)條件。鎳鈷親和層析實(shí)驗(yàn)利用不同濃度咪唑緩沖液純化出帶有六個(gè)組氨酸（his）標(biāo)簽的蛋白,最終取得大量多效生長(zhǎng)... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

pET-28a質(zhì)粒圖譜

圖 3.1 pET-28a 質(zhì)粒圖 PTN 用 BamHⅠ和 NdeⅠ連接產(chǎn)物在 Rosetta DE3隆，并提取質(zhì)粒。BamH粒鑒定結(jié)果如圖 3.2 所示

白誘導(dǎo)條件研究結(jié)果499-2 菌生長(zhǎng)曲線的繪制 499-2 號(hào)菌液活化后，次日取 100μl 菌液于 10mlLB 中。37℃、轉(zhuǎn)速培養(yǎng)，于 0h、2h、4h、6h、8h、10h、12h、14h；以 lg10×OD60間為橫坐標(biāo)繪制菌生長(zhǎng)曲線。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]PTN與腫瘤的相關(guān)性研究進(jìn)展[J]. 彭劍.  現(xiàn)代醫(yī)院. 2016(12)
[2]多效生長(zhǎng)因子對(duì)小鼠子宮基質(zhì)細(xì)胞蛻膜化的影響[J]. 于海帆,郭傳輝,李當(dāng)當(dāng),張虹亮,耿爽,楊占清,郭斌,岳占碰.  吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016(05)
[3]人類多效生長(zhǎng)因子Pleiotrophin的原核表達(dá)[J]. 李紅,劉成倩,易建中.  上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2016(03)
[4]Role of pleiotrophin-protein tyrosine phosphatase receptor type Z signaling in myelination[J]. Akihiro Fujikawa,Masaharu Noda.  Neural Regeneration Research. 2016(04)
[5]多效生長(zhǎng)因子在結(jié)直腸癌中表達(dá)的比較[J]. 謝曉.  中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2016 (03)
[6]多效生長(zhǎng)因子和MMP2在浸潤(rùn)性乳腺癌中表達(dá)的免疫組化研究[J]. 王振威,吳靜,張占東,袁媛.  臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2015(21)
[7]多效生長(zhǎng)因子在消化系腫瘤中的表達(dá)及意義[J]. 王仙琦,韓文文,關(guān)景明,李慧娟,張旭.  胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志. 2014(08)
[8]多效生長(zhǎng)因子通過誘導(dǎo)腫瘤血管生成、重建腫瘤微環(huán)境和活化基質(zhì)纖維發(fā)揮多功能腫瘤啟動(dòng)子作用[J]. 韓文文,李慧娟,王仙琦,關(guān)景明.  胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志. 2014(07)
[9]多效生長(zhǎng)因子基因轉(zhuǎn)染小鼠脂肪來源干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 陳昌金,袁惠,辜海英,楊雪梅,趙梓亦.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2013(08)
[10]多效生長(zhǎng)因子在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J]. 陳南征,孫學(xué)軍,賀賽,鄭見寶,任燕飛,王煒,魏光兵,姚建鋒,張立.  中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志. 2013(06)



本文編號(hào)：3455496